谢玉瑾，宋雪云，马永春

结核病是一种由单一传染源引起的传染性疾病，严重威胁人类生命健康[1]。结核分枝杆菌属于革兰阳性菌，主要侵犯肺脏，引发肺结核病。结核分枝杆菌主要在巨噬细胞内寄生，当人体免疫力较强时，巨噬细胞可以杀灭细胞内寄生的病原菌，而当人体免疫力较弱时，巨噬细胞免疫反应能力降低，病原菌在巨噬细胞内长期存在[2]。长链非编码RNA（long-non-coding RNA, lncRNA）在人体免疫反应、炎症反应、细胞运动、新陈代谢等过程中发挥作用，是近些年生命科学领域研究中的重点和热点[3]。研究发现，lncRNA和结核病发生有关，参与巨噬细胞清除结核分枝杆菌过程，可能是疾病治疗的分子靶标[4]。lncRNA PCED1BAS1是在结核病患者中表达下调的调节因子，影响巨噬细胞凋亡，可能是结核病进展中的抑制因子[5]，目前尚未明确其在巨噬细胞清除结核分枝杆菌以及分泌炎症因子中的作用。本研究以巨噬细胞RAW264.7作为研究对象，探讨PCED1B-AS1在巨噬细胞清除结核分枝杆菌以及分泌炎症因子中的作用和可能机制，旨在为分子靶向治疗结核病提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料 巨噬细胞RAW264.7购自南京科佰生物科技有限公司；结核分枝杆菌H37Rv购自美国ATCC；pcDNA-PCED1B-AS1、pcDNA均由云舟生物科技（广州）有限公司构建；核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（NLR family pyrindomain containing 3, NLRP3） 小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）、siRNA control由汉恒生物科技（上海）有限公司构建；NLRP3抗体购自美国Abcam；引物由南京金斯瑞生物技术有限公司合成。

1.2 细胞感染模型构建 巨噬细胞于含有1%双抗、10%胎牛血清的RPMI1640中培养，培养温度37 ℃，培养箱中含有5%的CO2，细胞密度超过90%以后，进行细胞传代。……