刘晓奇

(平顶山市第二人民医院，河南 平顶山 467000)

系统性红斑狼疮(SLE)是临床常见的一种自身免疫性疾病，早期、轻型和不典型的病例日渐增多[1～3]。SLE发病进展过程中伴随着自身的抗体水平的变化，这可能对于SLE疾病的诊断提供一定的思路[4，5]。既往的临床上对于SLE常规诊断方法有症状检查及结合血象指标检查进行诊断确诊，但存在着灵敏度低、特异性差等问题，在临床上易出现误诊和漏诊，影响患者病情的诊疗活动[6]。在免疫性检测中也有着多种检测抗体的技术手段，酶联免疫吸附试验法(ELISA)和线性免疫印迹法(LIA)是两种常用的免疫性检测方法，但何种检测方法对于SLE疾病的自身抗体检测有更高的准确率，在临床上还未有深入的研究。本文探讨ELISA法及LIA法检测SLE患者自身抗体水平的临床应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017-10～2019-10平顶山市第二人民医院收治的疑似SLE患者200例为研究对象纳入SLE组，男109例,女91例，年龄35～69岁，平均(51.28±9.28)岁，基础疾病：高血压52例、糖尿病39例、高脂血症28例。

1.2 方法

ELISA法检测自身抗核小体抗体(ANAs)、抗双链DNA抗体(dsDNA)操作方法：SLE组患者和对照组受试者入院后采集患者的空腹静脉血约3mL，经KDC—40型低速离心机(安微中科中佳)离心，转速3000r/min，离心10min，分离得到血清样本，采用酶联免疫吸附试验试剂盒(上海罗氏诊断试剂公司)进行检测，检测仪器为安图2010型多功能酶标仪(郑州安图公司)，按照厂商试剂说明书操作，将标本血清用配制好的样本稀释液稀释 101倍后加入微孔板中，同时还应在相应微孔板中加入阴性对照、阳性对照和标准品，经过25℃孵育3h后，然后加入适量缓冲液进行洗涤，然后在每孔中加入终止液，然后采用酶标仪进行检测，读取在450nm波段的吸光度。结果判断：浓度>15U/mL时为阳性。

LIA法检测自身抗体操作方法：SLE组患者和对照组受试者入院后采集患者的空腹静脉血约3mL，经KDC—40型低速离心机(安微中科中佳)离心，转速3000r/min，离心10min，分离得到血清样本，采用线性免疫印迹法试剂盒(德国默克公司)进行检测，将检测膜条放入EUROBlotCamera印迹法自动操作仪(欧蒙医学诊断中国有限公司)的温育槽中进行孵育，30min后吸出液体用缓冲液清洗，然后加入酶结合底物继续温育30min，再次用清水洗涤后，把膜条置于绿色纸的黏性塑料膜上对齐，待膜条干透后用扫描仪扫描检测，结果判断为：>25时为阳性。

1.3 评价方法

SLE金标准诊断方法[7]：(1)颊部红斑；(2)盘状红斑；(3)光过敏；(4)口腔溃疡；(5)关节炎；(6)胸膜炎或心包炎；(7)肾脏病变；(8)神经病变；(9)血液学疾病；(10)免疫学异常；(11)抗核抗体；符合上述11项中任何4项或4项以上者，除外感染、肿瘤和其他结缔组织疾病后，可诊断为系统性红斑狼疮。

对SLE组和对照组受试者的两种检测方法检出自身抗体的阳性率进行统计对比，并根据ELISA法、LIA法检测出SLE、对照组的自身抗体阳性率，对两种检测方法的诊断性指标进行统计对比，诊断性指标包括灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测性、准确度。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 两种检查方法的阳性例数对比

根据金标准诊断方法，200例疑似SLE患者中确诊为SLE阳性患者183例，阴性患者17例(系统性血管炎7例、成人斯蒂尔病6例、皮肌炎4例)。见表1。

表1 两种检查方法的阳性例数对比

2.2 两种检查方法的诊断性指标对比

在诊断性指标对比中，ELISA法的检测灵敏度、准确度均高于LIA法(P<0.05)，见表2。

表2 两种检查方法的诊断性指标对比[n(%)]

3 讨论

有研究表明在SLE发病进展过程中伴随着自身的抗体水平的变化，随着抗核抗体检测方法的不断进展和技术更新，抗体水平检测在诊断自身免疫性疾病中具有重要的临床实用价值[8，9]。在目前的临床上对于SLE自身抗体的检测，其中以ELISA法和LIA法居多，成为临床实验室最常用的两种检测自身抗体的方法。但在两种方法间是否还存在着一定的差异，在临床上未有深入的研究报道，为此本研究采用的对比分析的方法对ELISA和LIA法检测SLE患者自身抗体水平的准确度开展了深入研究。

在本研究中对SLE患者和健康对照组分别采用了ELISA法和LIA法检测自身抗体的阳性表达情况，结果显示ELISA法检测SLE组患者自身抗体阳性率高于LIA法，在对照组中ELISA法检测自身抗体阳性率低于LIA法，方法间对比差异有统计学意义，表明相比于LIA法，ELISA法能够更为准确的检测SLE患者的自身抗体表达。在诊断性指标对比中，ELISA法的检测灵敏度、特异度、准确度均高于LIA法，表明经ELISA法检能够进一步提高患者的SLE检出率，有助于SLE与疑似患者的区别诊断。在这是因为ELISA法由纯化抗原加强细胞核的提取物组成的商品化试剂盒出现，大大提高了ELISA法检测自身抗体敏感性及特异性，并可通过酶标仪读数排除人为的主观判断，容易实现自动化[10，11]。并且ELISA法具有操作方便，费用低廉，不需要特殊设备的优点，适合基层医院及标本量较多的实验室进行筛查。LIA法可一次性检测多种特异性自身抗体，直接用于诊断SLE和鉴别诊断其他自身免疫性疾病，具有较高的特异性，但LIA法是检测也存在着特异性抗体种类有限等不足，一定程度上限制了LIA法在SLE检测中的应用[12，13]。

综上所述，ELISA、LIA法均可用于SLE患者自身抗体的检测，与LIA法相比，ELISA法检测的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测性、准确度更高，在系统性红斑狼疮的诊断中有更好的应用价值。