张 艺 李廖英子 韩爱庆 吴璐蔚 孙彤彤 范淑月 倪钰莹 刘 敏

（北京中医药大学，北京 100029）

T细胞作为机体适应性免疫重要的参与细胞，在抗原提呈细胞的作用下激活，并向Th2方向分化，进而产生白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-5（IL-5）、白细胞介素-13（IL-13）等Th2型细胞因子并作用于下游细胞，引起嗜酸性粒细胞等炎症细胞聚集在患部，出现炎症反应。本课题组前期研究发现，麻黄细辛附子汤可升高T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值，并在体外能促进活化的T细胞增殖并抑制向Th2细胞的分化［1］。麻黄细辛附子汤能够调控树突状细胞IL-4/STAT6通路，降低IL-4、IL-13含量，抑制IL-4 mRNA、STAT6 mRNA的表达，从而调节Th1/Th2失衡［2］。此外，对于经胸腺基质淋巴生成素（TSLP）刺激的树突状细胞，麻黄细辛附子汤能升高干扰素-γ（IFN-γ）mRNA，下调IL-4 mRNA的表达，同时抑制IL-13，促进IFN-γ的分泌，恢复Th1/Th2失衡［3］。刘书宇等［4］亦从细胞因子失衡的角度研究，发现此方通过使IFN-γ含量升高，IL-13含量降低来纠正体内Th1和Th2表达失衡从而抑制炎症。本次实验中，在体外培养的CD4+T细胞中加入抗IFN-γ抑制T细胞向Th1方向的分化，重点从影响Th2细胞分化及 IL-4、IL-5、白细胞介素-10（IL-10）、IL-13、白细胞介素-17A（IL-17A）与STAT6 mRNA表达角度观察各给药组干预情况。现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物

C57BL/6雌性小鼠4周龄，SPF级，体质量（25±5）g，购于北京斯贝福生物技术有限公司，许可证号：SCXK（京）2016-0002。实验前适应性饲养1周，正常饮食、饮水，温度为（22±2）℃，湿度为（60±5）%。

1.2 试药与仪器

实验所用麻黄、细辛、附子3味中药均购自北京中医药大学国医堂。CytoBox Th2 mouse（编号：130-107-760，Miltenyi），T Cell Activation/Expansion Kit mouse（编号：130-093-627，Miltenyi），MACS Smart Strainer 70 μm（编号：130-098-462，Miltenyi），Spleen Dissocia⁃tion Kit mouse（编号：130-095-926，Miltenyi），Gentle MACS 25 C Tubes（编号：130-093-237，Miltenyi），APC anti-mouse CD3（编号：100236，Miltenyi），流式多因子检测试剂盒［编号：A211164（IL-5）、A211128（IL-13）、A211119（IL-10）、A211134（IL-25）、P200201（Basic kit），Miltenyi］，胎牛血清（编号：备 10099141，Invitro⁃gen），RPMI Medium 1640（编号：备……