杨鑫，徐晶，马坤，王娜，杨广德，南冠军

(1.西安交通大学第二附属医院，陕西 西安 710004；2.陕西省人民医院，陕西 西安 710068；3.西安交通大学药学院，陕西 西安 710061)

柚皮苷(Naringin，NRG)是一种双氢黄酮类化合物，主要存在于芸香科柚、葡萄柚和酸橙等植物中。柚皮苷具有多种生物学活性，如抗病毒、抗炎、抗过敏、镇痛等，还能通过调节血液中胆固醇水平，减少血栓从而改善局部微循环，达到防治血管性疾病的目的[1-2]。

胃蛋白酶(Pepsin，Pep)，又称胃液素，是人类及多数哺乳动物胃肠道内的一种重要消化酶，对人类而言，Pep分子量约为35 kDa， 在37～42 ℃的酸性环境中具有最强活性[3]，主要是通过水解聚氨基酸间的肽键链接使食物中的蛋白类物质被消化[4]。胃液中的前体物质——胃蛋白酶原,在酸性条件下被激活后形成胃蛋白酶从而发挥作用[5]。胃蛋白酶目前被广泛应用于各类工业和食品生产中，包括方便食品、奶制品、消化药及口香糖加工制造，以及啤酒、果酒的澄清应用方面[6]。

天然活性化合物和蛋白质或酶等生物大分子的相互作用研究越来受到关注。小分子化合物与酶等生物大分子相互作用，一方面可能会引起酶的构象改变，影响其活性；另一方面会影响小分子化合物的吸收、转运等[7]。鉴于NRG广泛存在于一些水果中，Pep又是重要消化酶;因此有必要研究NRG和Pep的相互作用，从分子水平方面阐明NRG与Pep的作用特点[8-11]。因此本研究将通过研究NRG与Pep的荧光猝灭类型、结合常数K、结合位点数n、作用力类型、Pep构象的变化，结合NRG与Pep的氨基酸残基的距离r等关键参数的研究，并通过测定结合常数随温度的变化情况，进一步确定NRG与Pep的作用机制及可能性，为分子水平上研究NRG与Pep的作用特点提供信息[12-15]。……