王 辉，陈 强，李海波，张占琴

(西安交通大学第一附属医院：1.疼痛科；2.心血管外科；3.心血管内科；4.麻醉手术部&脑科学中心，陕西西安 710061)

小胶质细胞是中枢神经系统主要的免疫效应细胞之一，占脑细胞的10%～15%，在CNS稳态中发挥关键作用[1]。小胶质细胞激活及其介导的神经炎症反应在缺血性脑损伤、脓毒症脑损伤以及神经退行性病变等多种中枢神经系统损伤及疾病的病理过程中发挥重要作用[2]。核因子-κB调节蛋白3(tumor necrosis factor α-induced protein 3, TNFAIP3/A20)能够调控小胶质细胞的活性，小胶质细胞A20缺陷后放大脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的细胞损伤以及NLRP3炎症体激活，加重神经炎症反应[3]。脂联素(adiponectin, APN)是良好的胰岛素增敏剂、抗炎调节剂和抗动脉粥样硬化分子。最近研究证实，APN作为关键调节因子，不仅在代谢性疾病中发挥抗炎作用[4]，而且在中枢神经系统疾病中对炎症反应同样具有抑制作用[5]。本研究探讨了APN是否通过A20/NLRP3/胱冬肽酶-1(caspase-1)途径抑制LPS诱导的小胶质细胞炎症反应，为APN治疗中枢神经系统炎症性疾病提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物及试剂SD孕鼠购自西安交通大学实验动物中心，所有动物实验均遵循国家制定的有关实验动物保护和使用指南，并通过西安交通大学实验动物伦理委员会批准。DMEM培养基、Neurobasal培养基、胰蛋白酶和胎牛血清(美国Gibco公司)，二甲基亚砜(DMSO)和LPS(来源于Escherichia Coli O55：B5)(美国Sigma公司)，APN(以色列ProSpec公司)，TNF-α和IL-1β酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒(欣博盛生物科技有限公司)，BCA蛋白浓度测定试剂盒及ECL发光试剂盒(美国Thermo公司)，A20抗体(美国Santa Cruz公司)，Cd11b、NeuN、NLRP3和caspase-1抗体(美国Abcam公司)，β-actin抗体(武汉三鹰生物技术有限公司)。……