叶晓娟，吴 喆，孙燕玲**

(1.武汉市江岸区妇幼保健院，湖北 武汉 430000；2.湖北科技学院糖尿病心脑血管病变湖北省重点实验室)

目前，己经明确的肝癌发生危险因素包括肝炎病毒感染、肝硬化、黄曲霉毒素暴露和非酒精性脂肪性肝炎等，但仍有15%～50%的肝癌患者无法用现有的危险因素去解释。有研究证明，随着病程的延长，糖尿病患者的肝癌发病率比非糖尿病人群显著增加[1]。流行病学调查显示，糖尿病可使包括肝癌在内的多种恶性肿瘤的发生风险增加[2]。谷氨酸-脯氨酸-亮氨酸富集蛋白1(proline-,glutamic acid-,and leucine-rich protein 1,PELP1)已被证实在多种激素依赖性肿瘤中异常表达[3]，并参与多种非激素依赖性肿瘤的进展[4]，但对其在肝癌发生中的作用尚未有明确阐述。本研究通过高脂饲料饲养建立糖尿病小鼠模型，并采用腹腔注射二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine，DEN)的方式来诱导糖尿病小鼠肝癌形成，探讨PELP1在二乙基亚硝胺诱导糖尿病小鼠肝癌形成中的表达及意义，为肝癌的发生寻求新的危险因素和标志因子。

1 材料与方法

1.1 实验动物

雄性C57BL/6小鼠32只，SPF级，6～8周龄，体重20～25g，购自湖北省实验动物研究中心，动物合格证号为42000600033780。动物自由饮食进水，动物房的温度设定为22℃～26℃，12h昼夜节律。

1.2 仪器和试剂

BAS124S电子天平购自德国Sartorius公司；MDF-U53V-80℃超低温冰箱购自日本Sanyo公司；3K15德国Sigma高速冷冻离心机购自德国Sigma公司；Indiko全自动生化分析仪购自美国Thermo Scientific公司；Epoch全波长酶标仪购自美国Biotek公司；CFX Connect荧光定量PCR仪购自美国Bio-Rad公司。

高脂饲料购自美国Research Diets公司；DEN购自上海源叶生物科技有限公司；……