水通道蛋白3在大鼠结肠黏膜中的表达
2021-07-05刘耀文曾玉娟瞿丹粟慧敏陈行徐赛群
刘耀文 曾玉娟 瞿丹 粟慧敏 陈行 徐赛群



摘要:目的:探讨水通道蛋白3(aquaporins,AQP3) 在大鼠结肠黏膜中的表达。方法:挑选10只Sprague-Dawley(SD) 大鼠,体重(200±50) g,雌雄各半,并将动物麻醉处死后取近端结肠和远端结肠组织,用冰PBS溶液冲洗干净后分成三部分,一部分置于冻存管中-70℃保存用于提取RNA,一部分置于冻存管中-70℃保存用于提取蛋白,剩余的组织放入4 %多聚甲醛中进行固定,石蜡包埋后制备组织切片(厚度4 ?m) 。结果:RT-PCR结果表明在近端结肠和远端结肠有丰富的AQP3 mRNA表达,且远端结肠AQP3 mRNA表达明显高于近端结肠AQP3 mRNA表达;Westernblot来检测大鼠结肠AQP3蛋白的表达,AQP3的光密度值除以β-Actin的光密度值用以做标准化。结果显示近端结肠有两条AQP3条带:一条位于27 kDa,代表未糖基化的AQP3;另一条位于30-40 kDa,代表糖基化的AQP3。而远端结肠仅有一条位于30-40 kDa的糖基化的AQP3条带。定量结果显示近端结肠和远端结肠有丰富的AQP3表达;免疫组化来检测大鼠消化系统AQP3的定位。在大鼠结肠中AQP3主要表达单层柱状上皮;且在近端结肠和远端结肠,AQP3常表达于表面吸收上皮细胞的基底侧膜上和肠隐窝的颈部。结论:AQP3表达于单层柱状上皮细胞(近端结肠和远端结肠) 的基底侧膜上。
关键词:AQP3;AQP3 mRNA;结肠黏膜
水通道蛋白(aquaporins,AQPs) 是一类存在于细胞膜的小分子蛋白,在动植物体内广泛表达。AQP3广泛表达于消化系统、呼吸系统、泌尿系统和皮肤系统的上皮组织中。AQP3阴性的小鼠中角质层水合作用减少,皮肤的弹性降低。消化系统中也可能有类似的作用[1]。另一个可能作用是指向固有层的跨上皮液体流动,作为小肠中水吸收的机制。……
