张颖，张赟赟，巫凯，陈锋，李嘉，杨海船*（1.广西壮族自治区中医药研究院化学所，南宁 530022；2.广西中药质量标准研究重点实验室，南宁 530022）

光茎栓果菊（Launaea acaulis）为菊科栓果菊属植物，又称土蒲公英、滑背草鞋，主要分布于广西、广东、贵州、云南等地。全草或根入药，具有清热解毒、利尿之功效，用于痈疽疔疮、尿路感染[1-2]。广西民间将其煮水服用治疗乳腺癌，有较好的疗效。本实验前期采用MTS法检测细胞活性，发现光茎栓果菊醇提物的石油醚萃取部位在体外对乳腺癌MCF-7细胞、白血病HL-60细胞和结肠癌SW480细胞的增殖有抑制作用，抑制率分别为90.61%、91.36%、84.44%。目前，光茎栓果菊的化学成分、药理作用研究等仍处于空白，栓果菊属植物化学成分相关研究也未见报道。光茎栓果菊的药效物质基础不明确，不能指导其临床的使用。为填补其研究空白，也为开发抗肿瘤的新药物提供依据，本研究对光茎栓果菊醇提物的石油醚萃取部位进行甲酯化处理，采用GC-MS对其进行分析，为系统地研究光茎栓果菊化学成分提供参考。

1 仪器与材料

Agilent 6890A气相色谱-5973N质谱联用仪（美国Agilent 公司）；FA1004 N分析天平（上海精科，精度：0.1 mg）；石油醚（60～90℃，广东光华科技股份有限公司，批号：20191214，分析纯），正己烷（广东光华科技股份有限公司，批号：20191010，分析纯）；无水硫酸钠（广州化学试剂厂，批号：20180718，分析纯）；光茎栓果菊购自南宁水街草药市场，经广西中医药研究院黄云峰副研究员鉴定为光茎栓果菊（Launaea acaulis）的全草。

2 方法

2.1 供试品制备

称取光茎栓果菊全草10 kg，粉碎，用95%乙醇回流提取3 次，过滤，合并滤液，减压回收乙醇，得总浸膏，加水混悬，用石油醚萃取，回收溶剂得石油醚萃取物。取石油醚萃取物1 g，置于50 mL具塞烧瓶中，加正己烷20 mL溶解，加1%硫醇甲醇溶液10 mL，摇匀，于70℃恒温水浴1 h，加纯净水20 mL，振摇，静置待分层清晰后取上清液，经无水硫酸钠脱水，过滤，滤液作为供试品。

2.2 GC-MS分析条件

2.2.1 GC条件 RTX-5MS毛细管色谱柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；升温程序：初始温度60℃，以5℃·min－1升温至100℃，以10℃·min－1升温至200℃，以5℃·min－1升温至260℃保持10 min；载气为He；进样量1.0 μL；分流比为50∶1。

2.2.2 MS条件 电离方式EI，电离能量70 eV，进样口温度230℃，离子源温度230℃，扫描质量范围为50～1000 amu，扫描时间100 s，柱流量1.0 mL·min－1。

2.3 分析方法

取“2.1”项下供试品，采用GC-MS分析，所得的MS图通过HPMSD化学工作站NIST98标准质谱数据库检索，分别对各色谱峰进行确认，并按峰面积归一化法计算各化合物的百分含量。

3 结果与分析

按“2.2”项下条件对供试品进行GC-MS测定，得到光茎栓果菊醇提物的石油醚部位脂溶性成分的总离子流图，见图1（各峰号对应成分见表1）。

图1 光茎栓果菊脂溶性成分总离子流图Fig 1 Total ion flow chart of liposoluble components in Launaea acaulis

按峰面积归一化法计算各化合物的百分含量，本实验从光茎栓果菊石油醚部位鉴定出29个化合物，主要为有机酸类化合物，其中棕榈酸占18.08%，亚麻酸占16.83%，亚油酸占15.22%，硬脂酸占12.90%，10-甲基十八烷酸占8.14%。这些成分均为首次从光茎栓果菊中鉴定出来。结果见表1。

表1 光茎栓果菊脂溶性成分GC-MS 分析结果Tab 1 GC-MS analysis of liposoluble components in Launaea acaulis

续表1

4 讨论

近年来，中草药抗肿瘤活性成分已成为研究热点。本研究从光茎栓果菊抗肿瘤活性部位共鉴别出29 个成分，其中有机酸类化合物的含量较高，依次为棕榈酸、亚麻酸、亚油酸、硬脂酸、10-甲基十八烷酸。亚油酸、亚麻酸为多不饱和脂肪酸，且为必需脂肪酸。有学者从体外细胞实验角度探讨多不饱和脂肪酸对结肠癌细胞LoVo和RKO的生长抑制、线粒体损伤、脂肪酸代谢等方面的影响，结果表明亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸、γ-亚麻酸在浓度大于 120 μmol·L－1时均能显著抑制LoVo和RKO细胞的生长，诱导细胞凋亡，但对正常细胞HUVEC影响较小[3]。而棕榈酸可通过内质网应激途径浓度和时间依赖性地降低成骨细胞增殖活性，增加细胞凋亡，增高细胞内质网应激相关蛋白和基因的表达[4-5]。因此，亚油酸、亚麻酸、棕榈酸可能为光茎栓果菊抗肿瘤活性成分。本研究结果可为广西特色药材光茎栓果菊的药效物质基础研究提供参考依据，促进该药材资源的合理开发和利用。