苗文娟，陈 强，曾 妍，朱双杰，董艺凝

(滁州学院生物与食品工程学院，滁州 239000)

滁菊又名“甘菊”、“白菊”，位列中国“四大药菊”之一[1-2]。因富含多酚以及黄酮类活性成分[3-5]，新鲜滁菊在采收、加工及贮藏过程中均易发生褐变，严重影响产品价值。有研究表明，多酚氧化酶（Polyphenol oxidase, PPO）和过氧化物酶（Peroxidase,POD）是引起菊花褐变的关键酶[6]，PPO 催化植物体内的酚类底物氧化成醌，醌类物质再相互聚合形成褐色化合物，导致植物组织褐变[7-8]。朱玉芸[6]对亳菊的酶促褐变相关酶及其品质影响进行了研究，其结果表明酶促褐变导致亳菊酚酸类物质含量显著下降，降低了亳菊的抗氧化性，影响了亳菊的药效和品质。目前，尚无研究者开展关于滁菊酶促褐变的相关研究。

在酶的分离纯化方面，多采用盐析、离子交换色谱以及凝胶过滤色谱等分离纯化手段[9-11]。但由于这些方法在操作过程中涉及操作周期长、提取率低、性能设备要求高等缺点，近年来，有一些新型分离纯化方法，如双水相萃取法、三相分离法等开始应用于酶的分离纯化[12-14]。三相分离法通过在提取液中加入无机盐和有机溶剂，可以选择性地将需要的酶分配到其中一相，蛋白质和油脂等其他杂质分配到其他相中，从而实现酶的纯化目的[15-16]。三相分离是一种简单、快速和易于放大的分离纯化酶的方法，不需要硫酸铵盐析时的多次分级沉淀[16]，也比柱层析法更加经济绿色环保。罗磊等[17]使用三相分离法对金银花POD 进行了分离纯化，发现经三相分离后金银花POD 纯化倍数达到5.849；……