刘 青， 赵德刚,2， 赵懿琛

(1.贵州大学山地植物资源保护与种质创新省部共建教育部重点实验室/贵州省农业生物工程重点实验室/生命科学学院/茶学院， 贵阳 550025；2.国家农业部植物新品种DUS测试贵阳分中心/贵州省农业科学院， 贵阳 550006)

古茶树(Camelliasinensis)是指生长在自然林中且树龄超过百年的野生茶树，还包括半驯化的人工栽培型野生茶树以及人工栽培超过百年的古茶园中的茶树[1]。经历自然选择生长下来的古茶树具有优良的抗性基因，不需要打药施肥，制成的茶叶绿色无污染，因此，近年对古茶树的研究越来越受重视。目前关于古茶树资源的研究主要集中在遗传多样性[2-4]、生化成分多样性[5-6]、抗性研究[7-8]等方面。随着生物技术的发展，遗传多样性研究已经不再局限于形态标记[9-10]、细胞标记[11]、生理生化标记[12]等传统的研究方法，基于基因组DNA水平的分子标记技术在种质资源的遗传多样性研究[13-14]、指纹图谱构建[15]、品种鉴定[16]等领域被广泛应用。

贵州是当今中国野生古茶树种质资源保存最丰富的省份之一[17]，据统计，贵州省88个县级行政区域中有52个县都有古茶树生长。其中，三都水族自治县地处云贵高原，境内山峦叠嶂、土壤肥沃、矿质元素和有机物质丰富，常年云雾缭绕、无霜期长、雨量充沛、年积温可达6 600 ℃[18]，是茶树的天然生长林，茶树资源丰富。

ISSR分子标记技术由于稳定性好、多态性高、成本低、DNA模板用量少[19]等特点被广泛应用于茶树的遗传多样性研究。吴田等[20]利用12条ISSR引物对17份云南茶树种质资源的亲缘关系进行分析，结果表明遗传相似系数介于0.50～0.88之间，聚类结果表明17分供试材料被分为两大类。……