邓姝颖， 白莉莉， 薛 阳， 陈 康， 蔡慧珍

（宁夏医科大学公共卫生与管理学院营养与食品卫生学系，银川 750004）

胰高血糖素样肽-1（glucagon-like peptide-1，GLP-1）是一种以葡萄糖依赖的方式增加胰岛素分泌[1]，同时还抑制胰高血糖素分泌[2]，由此对血糖水平进行调控的内分泌激素。2 型糖尿病（T2DM）患者的主要特征是由肠道L 细胞释放的GLP-1 水平降低。GLP-1 被 Wnt/β-catenin 信号通路下游靶基因GCG 基因编码，其分泌受到Wnt/β-catenin 通路的调控。细胞内第二信使环磷酸腺苷（cAMP）和环腺苷酸结合蛋白（Epac）二者相互作用，在胰岛素分泌调节过程中扮演重要角色[3]。研究表明[4-5]，cAMP 与 Epac 蛋白的表达与GCG 基因的转录以及GLP-1 的产生之间也存在某些联系。枸杞多糖（LBP）的降糖作用在本课题组前期实验[6]中已得到证实，但其具体作用机制还有待明确。因此，本实验在GCG 基因转录的水平分别从Wnt/β-catenin 信号通路及cAMP/Epac途径研究LBP 对GCG mRNA 的影响，推测LBP 可能通过这两种途径影响GCG 基因的表达，进而参与GLP-1 的降糖作用。

1 材料与方法

1.1 材料

小鼠小肠内分泌细胞（STC-1）购于上海名劲生物科技有限公司；高糖DMEM、胎牛血清（FBS）、PBS 购于以色列BI 公司；LBP 购于上海源叶生物有限公司；胰酶、双抗购于美国Gibco公司；细胞裂解液NP-40、PMSF 购于上海碧云天生物技术有限公司；细胞核与细胞质蛋白提取试剂盒、BCA 蛋白含量检测试剂盒、SDS-PAGE 凝胶试剂盒购于江苏凯基生物技术股份有限公司；βcatenin、FOXO4、TCF7L2、β-actin 抗体、重组蛋白Wnt3a 购于美国abcam 公司；通用抗体稀释液购于新塞美科技有限公司；二抗、荧光二抗购于北京中杉金桥生物公司；PVDF 膜购于美国Millipore 公司；含DAPI 的抗荧光衰减封片剂购于北京索莱宝科技有限公司；……