王淑婷，唐玉倩，刘增才，邹莉

(东北林业大学林学院，哈尔滨 150040)

暴马桑黄(Sanghuangporusbaumii)是寄生在暴马丁香树上的一种药用价值较高的大型真菌，具有抗菌消炎[1]、降血糖[2]、保护肝脏[3-4]、抗癌[5]等功效。其良好的药用效果主要源于其含有的多糖、黄酮、酚类、三萜等活性成分[6-7]。但是这些成分在暴马桑黄中含量很低[8]，难以满足生产需求。近年来，随着分子生物技术的发展，利用基因工程定向培育优质的暴马桑黄菌株成为一种可靠的技术手段，目前转基因技术已在多种真菌中成功实现，1986年MUNOZ-RIVAS等人在色氨酸营养缺陷型裂褶菌突变株中转入TRPC基因，成功获得正常菌株[9]；李刚等人在通过PEG转换缓冲液将大肠杆菌潮霉素B转磷酸酶基因转化到灵芝中，成功转化出能稳定表达出HmB抗性的转基因灵芝品种[10]。但目前食药用菌遗传转化依旧存在转化表达效率低的问题[11]，启动子是控制基因表达的重要工具，因此找到合适的启动子是提高食药用菌转化表达效率的关键。

食药用菌遗传转化所采用的启动子主要有两种：一种是ras启动子，另一种则是gpd启动子[12]。Hirano等在1999年从香菇中分离出gpd启动子，将其用于香菇转化体系的构建，结果显示该体系比ras启动子转化体系的表达效率高[13]，这说明gpd启动子比ras启动子具有更强的调控外源基因表达的能力。此外，gpd启动子已被用于灵芝[14]、双孢蘑菇[15]等多种食用菌转化表达载体的构建，表明运用gpd启动子进行食用菌转化有很高的可行性。本试验通过对暴马桑黄中分离出的gpd基因启动子序列进行克隆及序列分析，为建立高效稳定的暴马桑黄外源基因表达体系奠定基础，从而获得优质的目标菌株。……