马庆庆

(贵州航天医院中心实验室，贵州 遵义 563000)

肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，发病率和死亡率高居前列，多数患者确诊时已处于晚期，沿用传统治疗方案并未显著延迟患者生存期[1-5]。肿瘤免疫治疗是目前肿瘤研究的新思路，树突细胞(dendritic cells,DC)是抗原提呈细胞(Antigen Presenting cell,APC)，可激发机体T细胞应答，在机体抗肿瘤免疫应答中发挥着重要作用[6]；细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer cells,CIK)兼具T细胞强大的抗肿瘤活性和NK细胞非主要组织相容性复合物(MHC)限制性杀瘤的特点[7-8]，DC和CIK细胞体外联合培养具有强大的抗肿瘤作用。本研究以人肺癌细胞抗原致敏的DC诱导出特异性CIK细胞(DC-CIK)，探讨DC-CIK细胞对肺癌细胞的体外杀伤作用，同时测定细胞因子IL-12和IFN-γ的分泌水平，旨在为肺癌的特异性细胞免疫治疗提供基础依据。

1 资料与方法

1.1一般资料：选取健康体检者20例，性别、年龄随机分布。排除标准：①肺结核、高血压、糖尿病、自身免疫性疾病及服用免疫抑制药物等患者；②孕妇或哺乳期妇女；③HBV、HCV、HIV 感染者或(和)AIDS 患者。本次研究经过本院医学伦理委员会同意。

1.2仪器与试剂

1.2.1主要仪器：流式细胞分析仪(Beckman Coulter，美国)，血细胞分离机(Fresenius，德国)，CO2细胞培养箱(Thermo，美国)，倒置显微镜(Olympus，日本)，台式低速大容量离心机(湘仪，中国)。

1.2.2主要试剂：Ficoll-人淋巴细胞分离液(Solarbio，中国)，RPMI-1640培养基(Gibco，美国)，胎牛血清(Gibco，美国)，重组细胞因子(IFN-γ、TFN-α、GM-CSF、IL-4、IL-2)(Pepro Tech，美国)，Anti-CD3McAb(北京同立海源生物，中国)，检测T细胞亚群各种抗体(Beckman Coulter，美国)，CCK-8试剂盒(碧云天生物，中国)，ELISA试剂盒(R&D systems，美国)，人肺癌A549细胞株(中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心，中国)。……