李贵兰，陆丽平，饶晓松

结直肠癌的发病率、病死率均较高，腺癌是其常见类型，根据其组织病理学特点可将腺癌分为多种亚型，其中黏液性结直肠腺癌(mucinous colorectal adenocarcinoma, MCA)占结直肠腺癌的15%～20%，与非黏液性结直肠腺癌(non-mucinous colorectal adenocarcinoma, non-MCA)相比，MCA分化程度低且恶性度高，MCA患者常表现较高的转移风险，手术和化疗后效果不佳，预后较差[1]。近年免疫检查抑制剂在癌症免疫疗法中备受关注，应用程序性死亡蛋白-1(programmed death protein-1, PD-1)或程序性死亡蛋白-配体1(programmed death protein-ligand 1, PD-L1)抑制剂的免疫疗法已成为治疗恶性肿瘤的有效手段，如非小细胞肺癌、肾细胞癌、黑色素瘤等[2-5]。在恶性肿瘤组织中PD-L1通过结合T细胞上的PD-1能抑制宿主T细胞对肿瘤组织的免疫反应[4-5]。PD-L1发挥作用与T细胞密切相关，特别是抗肿瘤CD8+T细胞，PD-L1阳性肿瘤细胞和CD8+T细胞是新辅助化疗治疗局部晚期直肠癌患者预后的关键标志物[6]。本文应用免疫组化法检测MCA和non-MCA中PD-L1和CD8的表达，探讨两者之间是否存在差异，以期为临床免疫疗法提供线索。

1 材料与方法

1.1 材料收集2017年1月～2020年6月北京大学国际医院接受手术治疗的结直肠癌患者106例，其中non-MCA 90例，MCA 16例，所有患者无免疫系统疾病，未合并其他肿瘤，术前均未接受治疗。查阅患者临床病理资料，男性68例，女性38例，年龄40～80岁，≤50岁者35例，>50岁者71例。

1.2 免疫组化鼠抗人PD-L1购自Gene Tech公司，鼠抗人MLH1购自徕卡公司，鼠抗人CD8、MSH2、MSH6、PMS2均购自北京中杉金桥公司，阿辛蓝/PAS染色试剂盒购自珠海贝索生物公司。应用徕卡全自动免疫组化仪(BOND-MAX，徕卡公司，德国)进行PD-L1、CD8、MLH1、MSH2、MSH6和PMS2染色，免疫组化染色采用EnVision两步法。

1.3 结果判定本组分别评估肿瘤细胞与肿瘤间质中PD-L1的免疫组化染色结果，肿瘤细胞阳性标准为仅有细胞膜染色(无论完整与否以及染色强度)。肿……