赵东陆，邢 琦，宋 航

弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma, DLBCL)是临床上常见的造血系统恶性肿瘤之一，具有侵袭性高、转移迅速等特点[1]。Wnt信号通路在肿瘤细胞增殖及恶性转化过程中发挥重要作用。NKD1和β-catenin作为Wnt信号通路活化的关键因子，其异常表达与肿瘤进展密切相关[2]。Cyclin D1是Wnt通路的下游靶基因，Cyclin D1高表达可促进癌细胞的增殖和迁移[3]。本实验拟分析NKD1、β-catenin和Cyclin D1在DLBCL中的表达，并探讨三者表达与DLBCL临床病理特征的关系及预后评估的应用价值。

1 材料与方法

1.1 临床资料收集2010年3月～2016年2月黑龙江省哈尔滨市第一医院收治的80例经病理学证实的DLBCL组织标本。所有入选患者在术前均未行放、化疗和其他治疗，且3年随访资料完整。根据中心母细胞数量确定FL分级，所有患者均为FL3级。80例DLBCL按照Ann Arbor分期标准[4]：Ⅰ+Ⅱ期39例，Ⅲ+Ⅳ期41例；参照Hans免疫亚型分类标准：生发中心B细胞(GCB)亚型38例，非生发中心(non-GCB)亚型42例；按国际预后指数(IPI)评分：0～2分(中低危组)35例，3～5分(中高危组)45例；根据发病部分是否侵犯结外器官分为：淋巴结内45例，侵犯结外器官35例。另选取同期淋巴结良性增生组织45例。DLBCL患者术后接受R-CHOP标准方案治疗，并均以电话、门诊等方式进行随访3年，记录患者总生存期(overall survival, OS)，OS定义为自确诊后至随访结束或死亡时间。

1.2 方法所有标本均经10%中性福尔马林固定，常规石蜡包埋、脱水、脱蜡、水化、抗原修复、滴加抗体、DAB显色、复染、封固。免疫组化染色采用SP法，试剂盒购自美国Abcam公司。兔抗人NKD1单克隆抗体、羊抗人β-catenin单克隆抗体和Cyclin D1单克隆抗体均购自北京奥维亚生物公司。DAB显色试剂盒购自美国Sigma公司。……