罗婉莹 曹敏 窦文婷 田睿 林敏 任来春 王浩华 邹原方

GD 是甲状腺功能亢进症(甲亢)的最常见病因,约占全部甲亢的80%～85%,临床表现主要为：①甲状腺毒症；②弥漫性甲状腺肿；③眼征；④胫前黏液性水肿［1］。GD 具有遗传易感性特点,其发病机制尚未明确,临床认为与自身免疫、遗传、环境因素有关,其中自身免疫为主要因素。在多种因素作用下,GD 可使机体免疫功能下降,导致抗原特异或非特异性抑制性T 细胞(Ts)发生缺陷、功能下降,继而削弱对辅助性T 细胞(Th)的抑制作用,加上Th 不适当致敏和白细胞介素-1(IL-1)、IL-2 等的共同参与,使特异性B 淋巴细胞产生大量异质性免疫球蛋白(自身抗体)［2］。其中NKT 细胞兼有NK 细胞和T 细胞的特性,具有双向免疫调节功能［3］。本研究旨在探讨GD 患者外周血中NKT 细胞及其细胞因子(IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α)的表达,从而探讨GD 的发病机制。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2018 年1 月～2019 年12 月在本院确诊的19 例GD 患者作为实验组,另选择同期19 例健康志愿者作为对照组。实验组患者均符合第7 版内科学诊断标准［4］,其中男5 例,女14 例；年龄18～59 岁,平均年龄(36.7±8.3)岁。对照组男11 例,女8 例；年龄18～59 岁,平均年龄(37.3±7.9)岁。两组一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05),具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 外周血NKT 细胞检测方法 仪器：贝克曼库尔特FC500MCL 流式细胞仪。试剂：单克隆抗体CD45-FITC、CD3-PC5、CD56-PE、RBC 裂解液(贝克曼公司提供)。步骤：在同一流式专用试管中加入上述单克隆抗体(CD45-FITC、CD3-PC5、CD56-PE)各5 μl,同时加入EDTA 抗凝全血50 μl,混匀,避光孵育20 min；加入RBC 裂解液500 μl 裂解20 min；加入磷酸缓冲盐溶液(PBS) 500 μl 上机检测。用CD45/SS 设门圈定淋巴细胞群,在十字门图中分析CD3+与CD56+双阳性区域细胞百分比,即为CD3+CD56+NKT 细胞百分比(NKT细胞百分比)。……