王 晓 茹，杜 梦 鸽，胡 木 子，姜 珊，张 春 枝

(大连工业大学 生物工程学院,辽宁 大连 116034)

0 引 言

L-阿拉伯糖异构酶(L-AI，EC 5.3.1.4)是一种胞内酶，它能催化L-阿拉伯糖生成L-核酮糖，由于D-半乳糖和L-阿拉伯糖在结构上具有相似性，因此该酶也可以将D-半乳糖催化为D-塔格糖[1]。

D-塔格糖是一种存在于自然界，但含量极少的低热量糖，可广泛应用于食品和医药领域。D-塔格糖甜度为蔗糖的92%，热量为蔗糖的1/3[2]。从甜度、口感及其他方面综合评价，它是有可能替代蔗糖的低能量糖。2001年，美国食品和药物管理局(FDA)确定D-塔格糖为普遍公认安全食品(GRAS)[3]。2014年，根据《中华人民共和国食品安全法》和《新食品原料安全性审查管理办法》有关规定，塔格糖被批准为新食品原料。D-塔格糖的生产方法有化学合成法和生物转化法[4]，但化学法副产物较多，纯化困难，环境不友好。生物法转化效率高、专一性强、副产物少、纯化步骤简单，是生产D-塔格糖的主要研究方向[5]。L-阿拉伯糖异构酶转化D-半乳糖生产D-塔格糖，是一种简便、高效、环保的方法，采用食品安全菌株生产D-塔格糖尤为重要。实验室先前筛选获得了一株产L-AI的乳酸菌，鉴定为短乳杆菌。本研究优化了该菌株的培养条件和产酶条件，以期提高菌株产酶能力。

1 材料与方法

1.1 材 料

短乳杆菌L.brevisD-tag1(MF 465792)，实验室分离保藏。

固体培养基(%)：L-阿拉伯糖2.0，酵母浸粉0.5，牛肉膏1.0，蛋白胨1.0，乙酸钠0.5，柠檬酸二铵0.2，K2HPO40.2，MgSO40.058；吐温80 0.1 mL，pH 6.0～6.2，琼脂粉2.0。121 ℃湿热灭菌20 min。

种子培养基(%)：L-阿拉伯糖2.0，酵母浸粉0.5，牛肉膏1.0，蛋白胨1.0，乙酸钠0.5，柠檬酸二铵0.2，K2HPO40.2，MgSO40.058，吐温80 0.1 mL，pH 6.0～6.2，加入灭菌CaCO31.0。……