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沉默LncRNA SLCO4A1-AS1通过靶向miR-876-3p抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭

2021-06-09王洪伟林娟海南医学院第二附属医院妇产科海南海口570311

中国老年学杂志 2021年11期
关键词:水平研究

王洪伟 林娟 (海南医学院第二附属医院妇产科,海南 海口 570311)

宫颈癌是女性第二大常见恶性肿瘤,更是导致女性癌症相关死亡的主要原因〔1,2〕。目前,随着手术、放化疗等诊疗手段的不断进展,宫颈癌的诊疗取得一定效果,但由于肿瘤的转移和复发,宫颈癌患者的长期生存率仍不理想。因此,迫切需要探索宫颈癌发生和转移的分子机制。长链非编码RNA(LncRNA)是一类长度超过200个核苷酸非编码RNA,没有或仅有有限的蛋白编码潜能〔3〕。研究表明,LncRNA通过调控肿瘤细胞增殖、侵袭和存活从而发挥癌基因或抑癌基因作用〔4〕。溶质载体有机阴离子转运蛋白家族成员4A1反义RNA1(SLCO4A1-AS1)是近年发现的一个LncRNA,其在结肠癌中发挥致癌基因作用,敲减SLCO4A1-AS1在体外可抑制结肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化,促进细胞凋亡,在体内抑制肿瘤的生长〔5〕。但目前并无SLCO4A1-AS1和宫颈癌的相关报道。miR-876-3p是一种抑癌基因,研究发现miR-876-3p在胰腺癌中表达下调,过表达miR-876-3p可抑制胰腺癌细胞的增殖和转移〔6〕。生物信息学分析显示,miR-876-3p是SLCO4A1-AS1的潜在靶基因,但SLCO4A1-AS1能否调控miR-876-3p表达进而影响宫颈癌的生物学行为尚未可知。因此,本研究旨在探讨SLCO4A1-AS1对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并初步探讨其可能分子机制。

1 材料与方法

1.1实验材料 宫颈癌细胞(SiHa、HeLa、C33a、Caski)和正常的永生化宫颈上皮细胞系Ect1/E6E7均购自美国ATCC;RPMI1640培养基和胎牛血清均购自美国Gibco公司;LipofectamineTM2000购自美国Invitrogen公司;si-con、si-SLCO4A1-AS1、miR-con、miR-876-3p mimics、anti-miR-con、anti-miR-876-3p、pcDNA、pcDNA-SLCO4A1-AS1、WT-SLCO4A1-AS1、MUT-SLCO4A1-AS1的构建测序及聚合酶链反应(PCR)引物均购自上海生工公司;逆转录试剂盒和SYBR Green PCR试剂盒均购自大连TaKaRa生物技术有限公司;……

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