夏 剑 杨 敏 赵 剡

(1 武汉大学中南医院急救中心，2 湖北省急救与复苏临床医学研究中心，武汉市 430071，电子邮箱：jianjian_1998@sina.com)

心肌细胞缺氧/复氧在临床上非常多见，如心肺复苏术后以及感染性休克、各种原因心力衰竭导致低心排、心肌梗死等治疗后。多项研究显示，复氧后的心肌细胞出现损伤表现，导致部分细胞发生凋亡[1-2]，从而影响了心肌的协调性和顺应性，引起心肌运动功能异常，最终影响心肌的泵血功能，严重情况下可出现心力衰竭，影响患者后期生活质量。脂氧素A4(lipoxin A4，LXA4)作为脂氧素家族的一员，参与机体细胞的各项调节作用，包括细胞凋亡、增殖趋化、免疫调节等[3-5]。本实验旨在探讨LXA4是否可以通过结合其相关受体来调节缺氧/复氧过程中心肌细胞的凋亡，减少心肌细胞的损伤，从而起到保护心肌细胞的作用。

1 材料和方法

1.1 材料与仪器 大鼠心肌细胞H9C2(美国菌种保藏中心)；杜氏改良伊格尔培养基(Dulbecco′s modified Eagle medium，DMEM,Gibco Invitrogen公司,批号：11965092)；台氏液(Procell公司，批号：PH19JAN019)；LXA4(Sigma-Aldrich公司,批号：L0521)；TRIzol试剂(Aidlab公司，批号：252250AX)，反转录试剂(GeneCopoeia公司，批号：R101-01/02)；cDNA合成试剂盒(赛默飞公司，批号：K1672)。ABI7900实时荧光定量PCR仪(ABI公司)。TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Abcam公司,批号：ab66110);大鼠甲酰基肽受体(formyl peptide receptor，FPR)2上游引物(5′-GCCAACTATTCCGTCCCTCT-3′)和下游引物(5′-CGGAATCCAGCTACCCAGAT-3′)、内参基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)上游引物(5′-ACAGCAACAGGGTGGTGGAC-3′)和下游引物(5′-TTTGAGGGTGCAGCGAACTT-3′)由擎科生物技术有限公司合成。

1.2 实验方法

1.2.1 细胞培养：将大鼠心肌细胞系H9C2细胞置于含有10%胎牛血清、100 U/mL青霉素和100 μg/mL四环素的DMEM中培养2 h,每隔24 h更换培养液1次，每2～3 d传代1次。取对数生长期的细胞(2×107个/L)进行实验。

1.2.2 心肌细胞缺氧/复氧……