秦 龙 罗彬予 李 婷 吕真冰

(川北医学院第二临床学院/南充市中心医院胃肠疝外科，四川省南充市 637000，电子邮箱：long821127@126.com)

胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor，GIST)是胃肠道最常见的间叶源性肿瘤，主要与原癌基因c-kit或血小板源性生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptor alpha,PDGFRA)基因突变有关[1]。选择性c-kit/PDGFRA受体酪氨酸激酶抑制剂—甲磺酸伊马替尼的问世，破解了GIST的治疗难题[2]。但随着治疗的深入，甲磺酸伊马替尼继发性耐药已成为GIST临床治疗的主要问题。目前，有关甲磺酸伊马替尼继发性耐药发生机制的研究主要集中于c-kit/PDGFRA基因二次突变诱导的受体再激活，但这尚不能充分阐明其耐药机制。Tarn等[3]的研究表明，发生甲磺酸伊马替尼继发耐药的GIST患者存在胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1 receptor，IGF-1R)基因扩增的现象。而IGF-1R同属于酪氨酸激酶受体，与配体结合后可引发下游信号通路的级联反应，从而促进细胞增殖[4]。本研究采用IGF-1R抑制剂AG-1024干预甲磺酸伊马替尼继发耐药性GIST细胞，了解细胞凋亡相关生物学特性及其可能分子机制，为甲磺酸伊马替尼继发耐药的GIST患者的临床治疗提供新思路。

1 材料与方法

1.1 材料 甲磺酸伊马替尼购自爱必信(上海)生物科技有限公司(批号：abs817884)，GIST-T1细胞购自上海钦诚生物科技有限公司；胰酶(批号：Z9503)和胎牛血清(批号：10099141C)购自北京智杰方远科技有限公司；IGF-1R抑制剂AG-1024购自美国Selleck Chemicals公司(批号：S1234)；蛋白激酶B(protein kinase B,Akt；批号：# 9272)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt；批号：# 9271)及β-肌动蛋白(β-actin；批号：# 5816)抗体购自Cell Signaling公司；聚偏二氟乙烯膜(批号：03010040001)购自Sigma-Aldrich公司；预染蛋白Marker购自上海钰博生物科技有限公司(批号：YBD1084)；……