李 旭，王 玥，刘国力

(1.中国医科大学附属第一医院药学部,沈阳110000；2.辽宁中医药大学解剖组胚教研室,沈阳110847)

木犀草素（luteolin,Lu）是存在于多种药用植物中的黄酮类化合物,具有多种药理活性,包括抗氧化、抗炎和神经保护等作用。有研究表明,木犀草素可通过抑制核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)入核而下调巨噬细胞中炎症细胞因子的表达,同时,它还可抑制一氧化氮和促炎性类花生酸的生成[1],说明其具有有效的抗炎作用。木犀草素联合芦丁组合物可以通过调节脑内递质水平、减少神经元损伤和抑制炎症反应从而改善MPTP 所导致的小鼠运动协调能力损伤[2]。因此,本研究通过腹腔注射MPTP 构建帕金森病（parkinson disease,PD）小鼠模型,并使用木犀草素处理,旨在研究木犀草素对帕金森病小鼠模型的影响,并探究其是否可通过TLR4/yD88/NF-kB信号通路抑制小鼠脑内黑质区免疫炎症反应而改善小鼠的运动能力。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 药品 木犀草素（成都瑞芬思生物科技有限公司）；β-actin,TH,Bcl2,BAX,TLR4,MyD88,p-p65/NF-kB,NF-kB 和HRP-labeled goat anti-rabbit/mouse IgG 抗体均来自于Cell Signaling Technology；免疫组化试剂盒（福州迈鑫生物技术有限公司）,牛血清白蛋白（Sigma）,小鼠的TNF-α,IL-6 和IL-1β 的ELISA 试剂盒均购自于Raybiotech；PVDF膜,蛋白Marker（Thermo）。

1.1.2 仪器 全自动旷场记录仪（江苏淮北正华）、旋转棒仪器（IITC Life Science）、低温离心机、酶标仪、BIORAD凝胶图像分析系统、电泳仪、水平摇床、组化显微镜、冰冻切片机。

1.1.3 试验动物与分组 10～12 周龄C57BL/6 野生型小鼠45 只,均购于北京华阜康生物科技股份有限公司[SCXK（京）2020-0004],体重20～25g。试验动物分笼饲养,每笼3～4 只,自由饮食,12h 昼夜交替饲养,饲养室温度保持在22～25°C。根据SPSS统计软件产生随机数字分为:对照组、模型组、治疗组,每组15只；……