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拟南芥MAPKKK16酵母双杂交诱饵载体的构建及毒性和自激活效应检测

2021-06-07雷柯煜邓治吴文冠程汉

热带农业科学 2021年4期

雷柯煜 邓治 吴文冠 程汉

(1海南大学园艺学院海南海口570228;2中国热带农业科学院橡胶研究所海南海口571101)

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPK)级联途径由丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶组成,能被各种细胞外刺激激活[1],通过磷酸化逐级活化将胁迫信号级联放大,传递至下游的靶蛋白,从而引起一系列生理生化反应。真核细胞都可以表达MAPK,其通路是由一种保守的三级激酶模式组成,即MAPK激酶激酶(MAP kinase kinase kinase,MKKK)、MAPK激酶(MAP kinase kinase,MKK)和MAPK[2],通过蛋白质磷酸化作用将上游信号级联放大传递至下游应答分子,从而激活抗逆基因的表达,使植物对逆境有一定的适应能力。MAPKKK是MAPK级联途径之中的组成部分,在植物生长发育及非生物胁迫响应过程中起着重要的作用[3-4]。

前期通过转录组分析方法比较了橡胶树抗寒品种93-114和低温敏感材料热垦501间的基因表达差异,发现一个MAPKKK基因在橡胶树抗寒品种中表达水平很高,而低温敏感材料中几乎不表达,推测MAPKKK可能在橡胶树抗寒能力形成中具有重要作用[5-8]。通过同源比对发现,该橡胶树MAPKKK和拟南芥MAPKKK16高度同源,且拟南芥MAPKKK16功能并未被鉴定,限制了该基因进一步研究。橡胶树作为研究对象培育时间长、操作复杂,且橡胶树转基因体系不够成熟[9],为了深入理解橡胶树MAPKKK基因功能,寻找行之有效的研究方法,利用模式植物同源基因分析鉴定来研究橡胶树MAPKKK基因。前期对拟南芥MAPKKK16的功能进行了初步分析,发现其能够调控植物的抗寒能力(未发表资料)。在此基础上,将拟南芥MAPKKK16基因……

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