雷明霞，徐 凯，彭 娟，李 梅，蒋 凛，余 姣

（内江市动物疫病预防控制中心，四川内江 641000）

当前，猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪圆环病毒病、猪伪狂犬病是猪群中最常发生且危害较为严重的传染病[1]，临床上非典型和多病原混合感染现象较为普遍[2-5]，制约着猪养殖业的健康发展。本研究采用荧光PCR/RT-PCR方法，以无害化处理收集点的病死猪为检测对象，进行猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪圆环病毒（PCV-2和PCV-3）、猪伪狂犬病病毒（PRV）5种病原的核酸检测，旨在了解内江市秋冬季病死猪群中这5种病毒的感染情况，以期为该市猪病防控提供依据。

1 材料与方法

1.1 样品来源

在内江市5个辖区的无害化处理收集点，每天采集1～2个收集点，根据采样当日无害化收集量及死猪来源，每个来源点随机采集3头（不足3头全采）病死猪组织病料（腹股沟淋巴结）。其中：秋季于2020年10月21—26日，在10个无害化处理收集点，共采集58份样品，来源于22个规模场和7个散养户；冬季于2020年12月1—7日，在14个无害化处理收集点，共采集50份样品，来源于18个规模场和5个散养户。采集的108份样品信息详见表1。

表1 内江市秋冬季无害化处理病死猪样品采集信息统计

1.2 样品前处理

从每份组织病料（腹股沟淋巴结）的3个位置取样品共约1 g，用眼科剪剪碎混匀后装入2 mL无酶离心管中；在全自动组织研磨仪中，加入1 mL PBS和金属研磨珠研磨2 min；待匀浆后，置于高速冷冻离心机8 000 r/min离心2 min；取上清液600 µL于1.5 mL灭菌离心管中，-20 ℃保存备用。

1.3 试剂来源

TGuide磁珠法病毒RNA/DNA提取试剂盒，购自北京天根生化科技有限公司（批号U8319）和西安天隆科技有限公司（批号20011710T913）；……