张宏竹,汪艳,常广军,沈向真

(南京农业大学动物医学院,江苏 南京 210095)

奶牛肝脏炎症是一种临床上常见的疾病，通常是由于瘤胃中的pH降低引起革兰阴性菌裂解，继而释放大量脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)，透过瘤胃壁经血液循环进入肝脏所导致[1-3]。LPS进入肝脏后，会被细胞表面的Toll样受体4(TLR4)识别，继而引起核因子κB (NF-κB)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)等一系列下游信号通路的激活，激活的NF-κB进入细胞核内，与炎症相关基因的启动子区域结合，调控其转录，促进白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)等炎性相关基因的表达[4]。本实验室前期研究证明，LPS能够引起奶牛肝脏原代细胞(BHEC)炎症以及脂肪酸代谢紊乱[5]，对奶牛乳腺上皮细胞的氧化应激和凋亡同样具有促进作用[6-7]。瘤胃来源的LPS也被证明和多种奶牛疾病有关，给奶牛养殖业带来巨大经济损失[8]。

牛磺酸(taurine，TAU)是一种动物机体内普遍存在的游离氨基酸，在许多生物进程中发挥重要作用[9]。研究表明牛磺酸对于减轻细胞损伤效果显著，赭曲霉素A引起的猪肾细胞凋亡和自噬在添加牛磺酸保护后被显著抑制[10]；同时牛磺酸能够缓解LPS引起的小鼠乳腺上皮细胞炎症反应[11]。但是牛磺酸是否可以用于保护LPS引起的BHEC炎症反应目前尚不清楚。本文旨在探究牛磺酸预处理对LPS引起的BHEC炎症反应的保护及相关信号通路的调控作用，为临床上治疗奶牛肝脏炎症提供一种可行的理论依据。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

LPS、牛磺酸，购自Sigma公司；RNA iso Plus，购自TaKaRa公司；DMEM/F12细胞培养基，购自Gibco公司；荧光定量、反转录试剂盒，购自南京市诺唯赞Vazyme生物科技股份公司；……