吕孙建 焦锦彪 刘 莉 袁雪梅 于 喆 张海琪杭小英 施伟达 吴颖蕾

白芍()提取物对中华绒螯蟹()造血组织发育及造血因子Astakine的影响*

吕孙建1焦锦彪2刘 莉3袁雪梅1于 喆1张海琪1①杭小英1施伟达1吴颖蕾1

(1. 浙江省淡水水产研究所 农业农村部淡水渔业健康养殖重点实验室 湖州 313001; 2. 西南大学水产学院 重庆 400715; 3. 浙江省农业科学院水生生物研究所 杭州 310021)

血淋巴细胞在甲壳动物免疫反应中起着非常重要的作用, 其主要由造血组织(Hematopoietic tissue, HPT)生成并随着开管式循环分布到身体各处。到目前为止, 还没有相关研究表明甲壳动物造血组织是否受草本植物的影响。本研究以中华绒螯蟹()为对象, 利用荧光定量PCR、免疫荧光和组织化学等技术, 初步探索了白芍()提取物对中华绒螯蟹造血组织和造血因子Astakine的影响。结果显示, 在原代培养的造血组织细胞中添加终浓度为0.85 mg/mL的白芍提取物后, 造血因子mRNA的表达量显著上调(<0.05)。进一步制备含1%白芍提取物的中华绒螯蟹饲料并进行饲喂实验, 结果显示饲喂含白芍提取物饲料的中华绒螯蟹造血组织的mRNA的表达量较饲喂前上调了10.5倍, 要高于对照组。免疫荧光结果同样表明, 饲喂含白芍提取物饲料后中华绒螯蟹造血组织的Astakine蛋白荧光信号也要强于对照组。通过造血组织的形态学观察和造血组织体重百分比的检测, 我们发现白芍组中华绒螯蟹造血组织含有较多卵形小叶, 且造血组织体重百分比较饲喂前增加了6.64%, 而对照组仅增加1.6%。免疫保护率实验显示, 在脂多糖急性刺激下, 白芍添加组的中华绒螯蟹的存活率(77.5%)要高于对照组(57.5%)。综上所述, 白芍提取物可以促进中华绒螯蟹造血因子的表达和造血组织的发育, 从而提高中华绒螯蟹的免疫调节功能。

白芍()提取物; 中华绒螯蟹(); 造血组织; 造血因子

中华绒螯蟹(), 又名河蟹、大闸蟹, 是我国的主要淡水养殖品种, 具有较高的经济价值, 其2019年养殖总产量达到了778682 t (Sun, 2013; Lv, 2015;于秀娟等, 2020)。随着人工养殖的迅速发展, 中华绒螯蟹病害问题越来越突出, 由于目前养殖过程中缺乏对幼蟹的病原检测, 且饲养密度过高以及抗菌药物的滥用, 病毒、细菌、寄生虫和真菌等各类病原微生物引起的疾病的暴发愈发剧烈, 严重影响了中华绒螯蟹的养殖效益, 给养殖户造成了巨大的经济损失(Lv, 2014)。目前针对中华绒螯蟹的疾病防控没有特别有效的办法, 仍然是以使用抗生素和消毒剂为主, 而这又会导致耐药菌的产生和疫病防控难度的进一步加大(Franz, 2020)。……