黄显晔，谢宇庭，张鹏宇

（1. 黑龙江省大庆市杜尔伯特县畜牧技术服务中心，黑龙江 大庆 163000；2. 黑龙江省齐齐哈尔市畜牧总站，黑龙江 齐齐哈尔 161006；3. 黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院，黑龙江 齐齐哈尔 161000）

益生菌是调节宿主肠道菌群平衡的重要微生物，近年来成为研究的热点，多项研究表明益生菌具有维持肠道菌群平衡、抑制致病菌繁殖、提高机体免疫力，降低腹泻率及促进饲料消化吸收等功能。2019 年农业农村部发布的第194 号公告，鼓励企业和研发机构加快开发生物饲料、酶制剂、益生菌、植物提取物等抗生素替代产品，促进畜牧业抗生素减量替代，确保畜禽产品质量安全，其中益生菌在畜牧兽医行业中具有巨大的应用前景。

本试验用粪肠球菌由仔猪直肠分离得到，经过相关鉴定及试验已确定其为益生菌，通过本次体外耐受性试验，验证其是否耐酸、耐胆盐及耐高温，为进一步研制微生态制剂提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验菌株 粪肠球菌(Enterococcus faecium)DM-F16 由大庆市某猪场仔猪直肠内容物分离获得。

1.2 试剂及设备 LB 固体培养基、LB 肉汤培养基（山东拓普生物工程有限公司）、猪胆盐（索莱宝科技有限公司）；立式压力蒸汽灭菌器（上海申安医疗器械厂）、立式小容量恒温培养摇床（上海世平实验设备有限公司）、洁净工作台（北京东联哈尔仪器制造有限公司）。

1.3 菌液制备 用无菌接种环挑取少量试验菌株于LB 平板培养基上，划线，37℃温箱培养24h，挑取单一菌落，接种到LB 肉汤培养基中，37℃培养至对数生长期后平板计数，取用菌液浓度为1.2×108cfu.mL-1。……