吴黎艳 陆增生 何蓓晖 陈永灿 陈芝芸#

1 浙江省立同德医院 浙江 杭州 300012

2 浙江中医药大学附属第一医院 浙江 杭州 310006

非酒精性脂肪肝病（NAFLD）具有广泛的疾病谱，其中包括单纯性非酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）、肝纤维化、肝硬化，甚至疾病终末期的肝细胞肝癌[1]。近年的研究显示，高脂饮食、肥胖等因素引发的脂质代谢紊乱所产生的脂毒性，导致肝脏内质网应激在NASH的发生进展中扮演着重要作用。本研究从内质网应激角度来研究益气补肾调脂方改善高脂高果糖饮食诱导的NASH小鼠的作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物：30只C57BL/6小鼠，雄性，SPF级，体重约20±2克，由上海西普尔-必凯实验动物有限责任公司提供，许可证号：SCXK（沪）2013-0016；饲养于浙江中医药大学实验动物中心。

1.2 益气补肾调脂方浸润膏的制备：黄芪、炒白术、茯苓、制首乌、淫羊藿、郁金、生山楂、海藻、桃仁，中药复方按10∶4∶5∶3∶4∶3∶8∶3∶3比例组成，由浙江中医药大学附属第一医院中药制剂室制成流浸膏。

1.3 主要实验仪器和试剂：ABI7900PCR仪（美国ABI公司），OSE-Y10电动研磨器（TIANGEN公司），JA1003N型天平（梅托勒-托利多仪器有限公司），恒温孵育摇床（美国Eppendorf公司），游离脂肪酸（FFAs）试剂盒（ELISA）由abcam公司提供（批号：ab65342），基因引物由上海生工生物技术（Sangon Biotech）公司设计，并由上海生工生物技术（Sangon Biotech）公司合成，见表1。

表1 内质网应激相关基因mRNA的引物序列

1.4 实验方法：30只小鼠适应性饲养1周后，随机分为5组，正常组、模型组、益气补肾调脂方高剂量组、益气补肾调脂方中剂量组、益气补肾调脂方低剂量组，每组各6只。正常组……