双水相萃取法提取地骨皮多酚及抗氧化活性研究
2021-05-20臧慧静刘学孙亚娟杨成
臧慧静,刘学,孙亚娟,杨成
(江南大学 化学与材料工程学院,江苏 无锡 214122)
地骨皮为茄科植物枸杞(LyciumchinenseMill.)或宁夏枸杞(LyciumbarbarumL.)干燥的根皮,可凉血除蒸,清肺降火,用于阴虚潮热,骨蒸盗汗,肺热咳嗽,内热消渴等[1]。国内外的研究表明,其富含的多酚类物质[2-4],如绿原酸、阿魏酸和大黄素等物质易溶于乙醇等有机溶剂中,具有一定的抗氧化活性[5-7]。
常见的地骨皮提取技术包括回流提取法[8]、表面活性剂辅助超声波法[9]、微波法[10]、超临界流体法等[11],但这些方法存在或部分存在能耗大、易污染环境或设备要求高等问题。双水相萃取技术具有设备要求简单、反应条件温和且耗时短等优点,已广泛用于天然产物分离领域[12-14]。本文以乙醇/硫酸铵双水相体系提取地骨皮多酚(LCPPs),并对LCPPs的抗氧化活性进行初步的研究。
1 实验部分
1.1 试剂与仪器
地骨皮,购自无锡市民大药房,产自甘肃,经鉴定为枸杞(LyciumchinenseMill.)的干燥根皮,粉碎后过60目筛,密封避光保存;人皮肤成纤维细胞(HSF 细胞),北京北纳创联生物技术研究院;抗坏血酸(VC)、硫酸铵、无水乙醇、过硫酸钾、2,2-二苯基-1-苦基肼(DPPH)、2,2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)、2,2-偶氮二(2-甲基丙基咪)二盐酸盐(AAPH)、荧光素钠(FL)、奎诺二甲基丙烯酸酯(Trolox)等均为分析纯;DMEM 培养液、青霉素-链霉素双抗、磷酸盐缓冲溶液(PBS)、胰蛋白酶溶液为美国 Hyclone 公司;CCK-8试剂盒、CuZn/Mn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法)、GSH和GSSG检测试剂盒来自碧云天生物技术研究所。
Synergy H4多功能酶标仪;Infinite M200 PRO紫外酶标仪;Olympus Ckx41倒置生物显微镜;SB-5200 DTD超声波清洗机;SW-CJ-2FD超净工作台;Centrifuge 5804 R离心机;3111培养箱; RE-52AA 型旋转蒸发器。……
