陈薪竹，杜华英，洪艳平，王 丹，王玉波，杨武英，熊建华

（江西农业大学食品科学与工程学院∕南昌市农产品加工与质量控制重点实验室，江西南昌 330045）

【研究意义】呋喃它酮是一种人工合成的硝基呋喃类抗生素[1-2]。研究表明，呋喃它酮及其代谢物5-吗啉甲基-3-氨基-2-恶唑烷基酮（5-methylmorpholino-3-amino-2-oxazolidinone，AMOZ）属于强致癌物，已被禁止使用[3-6]。呋喃它酮原药在动物体内代谢迅速，但其代谢物AMOZ会与动物细胞膜蛋白形成结合态长期存留在体内难以消除[7]，人类使用此类食物后会造成潜在危害，因此代谢物的检测比原药更有意义[8-9]。受经济利益驱使，此类药物非法使用情况仍很严重，所以建立AMOZ残留的检测方法有着十分紧迫的现实意义。【前人研究进展】AMOZ残留检测常用的方法主要有仪器分析法[10-15]和免疫分析法[16-18]等。免疫分析法作为近年来发展迅速的一种快检方法，操作简单、灵敏度高，在动物性食品AMOZ残留快速筛查中优势明显。在免疫分析方法建立中，抗体质量好坏直接影响其灵敏度。单链抗体（single chain variable fragment，scFv）作为基因工程抗体，是近年来的研究热点之一，分子量小、抗原性低，可通过发酵大量生产，极大程度上弥补了传统抗体的不足[19-20]，目前已成为了应用最广泛的基因重组抗体之一。且scFv能与碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，AP）有效结合形成融合蛋白，此融合蛋白在保留抗体分子生物活性的同时也保留了AP酶活性，在实际检测中免去了酶标二抗的使用，缩短了操作时间。【本研究切入点】本实验室已成功构建重组质粒plip6∕GN-AMOZscFv，可溶性表达载体plip6∕GN本身带有的AP酶基因，可将转入的scFv基因与载体中本身带有的AP酶基因进行融合表达，得到既具有抗体活性又保留AP酶活性的融合蛋白AMOZscFv-AP。……