张春莹 庞华胜 匡紫微 孟妍明 刘成桂 马 莹**

(1.四川大学华西医院实验医学科，四川成都 610041; 2.成都市妇女儿童中心医院，四川成都 610091)

溶组织内阿米巴原虫Entamoebahistolytica(E.histolytica)为内阿米巴科的内阿米巴属原虫，是目前国际公认的具有致病性的内阿米巴原虫，对动物和人具有侵袭性。近年来溶组织内阿米巴原虫在HIV/AIDS人群中的感染率呈上升趋势，是HIV/AIDS人群中感染率最高的致病性肠道原虫之一(Loetal.，2014；管悦等，2015)，也是导致患者长期性腹泻的主要病原体。由溶组织内阿米巴原虫引起的侵袭性阿米巴病是全球寄生虫感染相关死亡的主要来源，每年造成40 600～73 800人死亡(Lozanoetal.，2012)，在我国溶组织内阿米巴原虫感染仍是重要的公共卫生问题。目前，溶组织内阿米巴病的诊断在国内外均主要依靠涂片镜检法(Stanleyetal., 2003；邓爽等，2018)，但形态学镜检依赖检验者的丰富经验，且形态学无法区分致病性溶组织内阿米巴原虫E.histolytica和非致病性迪斯帕内阿米巴原虫Entamoebadispar(E.dispar)(Fotedaretal., 2007; McHardyetal., 2014)；免疫学ELISA方法简单快速，但有些检测试剂不能准确区分E.histolytica和E.dispar，且目前国内尚无商品化ELISA试剂盒，只能从国外购买、价格昂贵；PCR方法简单快速，敏感性和特异性高，能够区分E.histolytica和E.dispar，可有效对感染虫体量较少的腹泻患者进行辅助诊断，国内外学者评估报道了普通PCR法(庞华胜等，2019)和巢式PCR法(Shahrametal.，2006; 卢艳等，2016)在检测溶组织内阿米巴原虫感染中的应用，但使用Real-Time PCR方法的研究较少。本研究建立了可特异扩增溶组织内阿米巴原虫小亚基核糖体RNA(small subunit ribosome RNA，SSU rRNA)基因的Real-Time PCR方法，同时评价该方法在临床粪便标本中检测溶组织内阿米巴原虫的应用价值。……