罗文学,阿依木古丽,韩郁茹

(1.天祝县畜牧技术推广站，甘肃 天祝733299，2.西北民族大学生命科学与工程学院)

1 Fas基因与fasl的关系

Fas基因，又称APO-1、CD95，最早在90年代被迁本(Tsujitomo)发现的促细胞凋亡因子。Fas基因是由编码325个氨基酸组成的蛋白质，为肿瘤坏死基因超家族的成员(TNF-6)。Fas是一种分子质量约为48 ku的I型跨膜蛋白，广泛分布于人和动物机体的各组织中。

FasL，即Fas配体，是Ⅱ跨膜蛋白，相对分子质量约为40 ku。Fas和FasL二者在淋巴细胞的生长、发育、成熟、分化和免疫应答的过程中发挥重要作用。当Fas与FasL结合后，将导致Fas发生寡聚反应，进而引起细胞内死亡诱导信号复合体(DISC)的组装，该复合体通过激活起始caspase引发一系列有关酶的级联反应，最终导致Fas细胞凋亡。目前研究表明Fas和FasL通过介导细胞凋亡在肿瘤发生、自身免疫性疾病和感染性疾病等中起着重要的调控作用。研究表明卵泡闭锁发生于卵泡发育的任何时间内，并且逐步进行，多是相邻囊状较小的卵泡先发生闭锁。Fas作为细胞凋亡基因，探究其在卵巢不同发情周期中的信号转导作用，通过荧光定量RT-PCR技术进行生物学信息分析，为天祝白牦牛卵巢闭锁系统调节机制提供理论依据。

2 材料与方法

2.1 实验对象

本实验以健康天祝白牦牛的母牦牛作为实验对象。分别屠宰处于卵泡期、怀(10～30 d)、怀孕(40～60 d)、怀孕(70～90 d)、黄体期、乏情期的健康母牦牛，用无菌手术剪采集卵巢，用液氮保存并带回实验室进行mRNA荧光定量分析实验。

2.2 实验试剂与实验器材

实验试剂：TRIZOL试剂、M-MuLV第一链cDNA合……