谭敏 汪露 甘平 陈朝喜 李云

摘要：为了解牦牛源大肠杆菌agn43基因携带情况及其与生物被膜形成能力的相关性，分别采用PCR扩增和改良结晶紫半定量方法分别对分离鉴定的203株牦牛源大肠杆菌进行agn43基因检测和生物被膜形成能力分析。实验结果表明，分离的203株大肠杆菌中，147株agn43基因检测为阳性，检出率为72.4%；87.19%（177/203）的菌株具有生物被膜形成能力；agn43基因携带率与生物被膜表型之间存在较强的相关性（R2=0.98897）。

关键词：牦牛；大肠杆菌；agn43基因；生物被膜表型

Correlation analysis of agn43 and biofilm-forming phenotype in Yak-derived Escherichia coli

TANMin1， WANG Lu1，GANPing2，CHENChao-xi1， LIYun3*

（1.College ofAnimalHusbandryandVeterinarymedicine，SouthwestMinzuUniversity，Chengdu，Sichuan， China.；2.Instituteof AnimalHusbandry， GanziTibetanAutonomousPrefectureofSichuanprovince， China.3. HaidResearchInstitute， GuangdongHaidGroupCo.，Ltd，Guangzhou， Guangdong，China；4.ZhongshanYunshengAgricultural TechnologyCo.，Ltd.Zhongshan，Guangdong， China.）

Abstract： Tounderstandthecorrelationofagn43andbiofilm-formingabilityinYak-derivedEscherichia coli，PCRmethodandmodifiedcrystal violetstainingsemi-quantitativemethodwereperformedforagn43detectionandbiofilm-formingabilityanalysis， respectively.Theresultsshowed that147E.coliwereagn43positiveandthedetectionratewas72.4%； 87.19%（177/203）strainsrevealedbiofilm-formingability；Thereexisted correlationof agn43andbiofilm-formingphenotype（R2=0.9889）.

Key words： Yak；Escherichiacoli；Agn43gene；Biofilm-formingphenotype

大肠杆菌是一种常见的人和动物肠道寄生菌，可以引起人和动物多种不同程度的感染。牦牛大肠杆菌病是严重威胁高原畜牧业的一种重要疾病，一般呈散发或地方流行性，每年3～10月份发生，4～6月份是发病高峰期，泌乳期的母牦牛最易感染，其次为1～4月龄犊牛，公牦牛不易感。此外，大肠杆菌致病性的产生受毒力因子的调控，毒力因子相互协助完成大肠杆菌的粘附、定居、繁殖和致病的过程。

大肠杆菌同源转运蛋白Agn43是一种丰富的抗原外膜蛋白，Agn43是由agn43基因编码的，主要参与大肠杆菌的聚集、生物被膜的形成和上皮细胞的微集落的形成。相关研究发现，Agn43在早期生物膜中高表达，在成熟生物膜中缺乏Agn43，因此认为Agn43在生物膜形成过程中发挥早期作用[1]。生物膜是抵抗外界不良环境的影响而产生的一种生存方式，并作为抵抗机体防御和限制抗菌药物进入细菌的一道天然屏障[2]。一旦形成成熟的生物膜，大肠杆菌就能逃避宿主的免疫系统和阻碍药物的渗透，保护了细菌及其耐药基因的同时导致耐药性的传播，并且出现了许多多重耐药菌株，使得大肠杆菌的耐药性问题变得更加严重，给畜禽疾病的预防和控制带来更多的挑战。……