王 芳，王鹓臻，吴 佳，李亚俊

（宁夏医科大学总医院消化内科，银川 750004）

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）是一种肠道特发性炎症性疾病，可引起结肠持续的黏膜炎症，其活动期具有典型的症状，如腹泻、腹痛、黏液脓血便和体质量减轻[1-2]。研究表明，枸杞多糖（lyciumbarbarum polysaccharide，LBP）具有广泛的生物学特性，包括抗氧化、免疫调节以及肠道菌群的调控作用，对结肠炎的肠道症状具有一定的治疗作用[3-4]。Trek1（TWIK-Related K+Channel 1）是双孔结构域（K2P）机械门控钾通道，在结肠上皮细胞和平滑肌中特异性表达，维持肠上皮屏障完整性并参与肠道收缩的调节[5-7]。LBP能否通过调控结肠组织中Trek1的表达改善UC活动期症状尚不明确。本实验通过研究LBP对慢性UC模型鼠活动期症状的改变以及Trek1 mRNA和蛋白表达的影响，以期为LBP缓解活动期慢性UC的机制研究提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 试剂及仪器

葡聚糖硫酸酯钠盐（DSS）（MP生物医学公司）；LBP（百瑞源，含量≥50%）；联苯胺（艾科试剂）；总RNA提取试剂盒、总蛋白提取试剂盒（上海朗顿生物科技有限公司）；逆转录试剂盒、qPCR试剂盒（赛默飞世尔公司）；荧光定量PCR仪（赛默飞世尔公司）；兔抗Trek1/β-actin抗体、HRP-山羊抗兔抗体（Abcam公司）。

1.2 各组小鼠模型的制备

18只6～8周C57BL/6小鼠，体质量20 g左右，SPF级，随机分为正常组、造模组和治疗组，每组6只。正常组小鼠饮用dH2O 25 d，无特殊处理；造模组和治疗组小鼠第1～5、第11～15、第21～25天饮用2%的DSS，制备慢性UC小鼠模型并模拟慢性UC活动期；治疗组小鼠从第6天开始，每天给予200 mg·（kg·d）-1的LBP灌胃。各组小鼠第0、5、10、15、20、25天时测量体质量、评估肛周及收集粪便情况。造模组和治疗组小鼠第5天体质量和疾病活动指数（disease activity index，DAI）评分与正常组比较差异有统计学意义，则提示小鼠模型制备成功。……