黄争荣 林锦培 王 泳 赖义勤 张劭琴 何火聪

原发性肝癌(简称肝癌)是临床上常见的恶性肿瘤之一，在我国发病率居恶性肿瘤的第4位，肿瘤相关死亡第2位[1]。目前原发性肝癌的治疗手段有手术、介入、靶向等，但由于肝癌起病隐匿，恶性程度高，病程短，临床上较难早期发现，确诊时往往病情已进入晚期，无法进行根治性治疗，而中医药在肝癌综合治疗中具有日益重要的地位。既往研究[2，3]发现，通关藤对肝癌具有良好的抗肿瘤疗效，能够改善患者生活质量。因此，本研究就该药物的抗肿瘤作用作进一步探讨。

1 材料与方法

1.1 药物与试剂MTE购于南京圣和药业有限公司(商品名：消癌平注射液，国药准字Z20025868，生药浓度为2.5 g/ml)；胎牛血、胰蛋白酶-EDTA、DMEM/F12培养基(Hyclone公司，美国)；二甲亚砜(DMSO)(Gibco公司，美国)；四甲基偶氮唑蓝(MTT)(索莱宝科技有限公司，北京)；碘化丙锭、细胞周期试剂盒(Becton Dickinson公司，美国)。

1.2 主要仪器流式细胞仪(Becton Dickinson公司,美国)；IX70倒置相差显微镜(Olympus公司，日本)；冷冻离心机(Thermo Electron 公司，美国)；超净工作台(苏州净化设备公司，江苏)；CO2培养箱(Thermo Electron公司，美国)。

1.3 方法

1.3.1 细胞培养人肝癌细胞HepG2系由福建省肿瘤医院生物放射研究室传代培养。将HepG2肝癌细胞复苏后，悬浮生长于含10%胎牛血清的DMEM培养基中，在37 ℃、5%CO2培养箱中培养。取状态良好、处于对数生长期HepG2细胞进行实验。

1.3.2 MTT法检测MTE对HepG2细胞增殖的作用将HepG2细胞以密度为2×104个细胞/孔接种于96孔培养板，置于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养24 h待细胞贴壁，分别加入不同浓度的MTE (7.5 mg/ml、15 mg/ml、20 mg/ml、30 mg/ml、60 mg/ml)，同时设空白对照组和调零组，每组3个复孔，置CO2培养箱中继续培养12 h、24 h、48h。……