miRNA-135a靶向调控HOXA10蛋白对乳腺癌细胞生物学特性的影响研究
2021-04-30潘虹余小霞普艳红袁瑞仙
潘虹 余小霞 普艳红 袁瑞仙
乳腺癌是一种常见的女性恶性肿瘤,具有很高的发病率,在我国,乳腺癌在女性恶性肿瘤中排第三位,严重危害着女性的身体健康[1]。临床上虽然可通过手术治疗,但是由于乳腺癌本身的发病原因多样,涉及到的分子机制复杂,导致乳腺癌患者的长期生存率以及治疗预后并不理想[2]。相关研究表明非编码小分子RNA(microRNA,miRNA)是一类由19~22个核苷酸组成的小分子RNA,其可通过调节相关基因发挥促癌或者抑癌作用,与肿瘤密切相关,在细胞增殖、凋亡以及侵袭等过程中至关重要[3,4]。其中miRNA-135a是定位于 3号染色体的miRNA-135 家族的重要组成成员,相关研究表明miRNA-135a在脑胶质瘤、结肠癌、乳腺癌等恶性肿瘤中发挥重要的调控作用[5,6]。此外,同源框基因 HOXA10是胚胎发育过程中的重要转录因子,调节癌细胞的增生与分化。本研究将以MCF-7乳腺癌细胞作为模型细胞,探讨miRNA-135a对于乳腺癌细胞HOXA10表达的调控以及该作用对于乳腺癌细胞生物学特性的影响。
1 材料与方法
1.1 组织标本 收集2017年5月至2018年3月于我院就诊的58例乳腺癌患者癌组织及距离癌组织>2 cm 处的正常组织,经组织病理学检测证实为乳腺癌。所有入选患者在术前均未进行放化疗和其他治疗,且临床病理资料完整。58例乳腺癌患者,年龄25~65岁,平均年龄(40.73±12.37)岁;TNM分期:Ⅰ期患者20例,Ⅱ期患者12例,Ⅲ期患者18例,Ⅳ期患者8例;肿瘤直径<5 cm患者22例,≥5 cm患者36例;组织学分级:中高分化患者46例,低分化患者12例;共有36例发生区域淋巴结转移。所有患者同意本研究并签署知情同意书,且经我院伦理委员会审核批准后收集标本。
1.2 试剂与仪器 乳腺癌细胞系MCF-7购自上海中科院细胞库;miRNA-135a mimic以及miRNA-135a购买于GeenPharma; 胎牛血清购自Biowest公司;四甲基偶氮唑蓝 (methyl thiazolyltetrazolium,MTT)购自Sigma公司;结……
