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内皮糖萼损伤对黄芪多糖调控微血管内皮细胞分泌生物活性物质的影响

2021-04-29张志欢王兆丽

北京农学院学报 2021年2期

张志欢,孙 雄, 2,王兆丽,王 乾,张 涛*

(1.北京农学院 动物科学技术学院/兽医学(中医药)北京市重点实验室,北京 102206; 2.中牧实业股份有限公司,北京 100070)

内皮糖萼(endothelial glycocalyx)亦称“细胞衣”或“糖衣”,是内皮细胞表面一层富含多糖的绒毛状结构[1, 2],由蛋白聚糖和糖蛋白构成骨架分子与细胞膜相连,骨架分子上伸出大量的寡糖链。内皮糖萼覆盖于血管内皮细胞表面,具有保护内皮细胞[3]、调节血管壁的屏障和选择性通透[4, 5]、感受血流作用力[6]等作用,尤其对微血管内皮细胞(microvascular endothelial cells,MVECs),其大部分功能的发挥均有内皮糖萼的参与[7]。鉴于中药多糖与内皮糖萼在化学组成上的相似性,推测外源性中药多糖应能有助于改善内皮糖萼的结构或功能。前期研究[8, 9]表明,黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)能显著增加大鼠空肠黏膜MVECs糖萼的厚度,影响糖萼糖链的含量。MVECs的广泛生物学功能主要在于其能够产生多种多样的生物活性物质,中药多糖能够通过调控内皮生物活性物质的产生而影响MVECs的功能,而其对内皮生物活性物质的调控与对糖萼糖链作用的相关性尚不清楚。为了解内皮糖萼糖链在中药多糖调控MVECs分泌生物活性物质中的作用,本试验体外分离培养大鼠空肠黏膜MVECs,以肝素酶III(heparinase III,Hep III)处理,去除部分糖萼糖链,然后使用APS干预,检测一氧化氮(nitric oxide,NO)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和白介素6(interleukin 6,IL-6)分泌的变化。

1 材料与方法

1.1 主要仪器与设备

倒置荧光显微镜(Olympus,IX71型),酶标仪(Thermofisher,Multiskan Ascent型),分光光度计(尤尼柯上海仪器有限公司,UV-2000型),等。

1.2 主要试剂与药品

胎牛血清(Hyclone,货号……

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