王超超，姜 益，赵润英

(温州市中西医结合医院肾内科·浙江 温州 325000)

糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)发生率及死亡率逐年升高，严重影响患者的生命健康[1-2]。肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cells, GMCs)增殖、细胞外基质沉积、基底膜增厚并导致肾小球硬化是DN发病的主要病理过程，探究GMCs增殖和凋亡机理，是预防和治疗DN的关键[3-4]。单磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase，AMPK)/沉默信息调节因子1(silent information regulator 1，SIRT1)/过氧化物酶增殖物激活受体γ共激活因子1α(peroxidase proliferator-activated receptor gamma coactivator 1α，PGC-1α)信号通路参与机体氧化应激、炎症反应、细胞增殖、凋亡、自噬等生理过程，近来研究发现此通路也参与DN的发生发展过程[5-7]。木犀草素(Luteolin)是从木犀草的茎叶中提取的黄酮类化合物，具有抗炎、抗菌、抗肿瘤及心血管保护等多种生物学效应，大量文献研究发现Luteolin对DN肾损伤具有保护作用[8-9]，但Luteolin保护DN肾损伤的具体分子生物学机制还不明确。本研究通过体外培养小鼠GMCs，探讨高糖诱导条件下，Luteolin含药血清对GMCs凋亡及AMPK/SIRT-1/PGC-1α通路的影响，以期为临床治疗DN提供理论依据。

1 材料

1.1 实验动物及细胞株 健康雄性SPF清洁级SD大鼠，6～7周龄，体质量 200～220 g，购自于广东省医学实验动物中心，许可证号：SCXK(粤)2018-0002。饲养于本院动物饲养中心，本研究经本院动物伦理委员会批准同意，批号为IACUC-01(20160917)。SV40 MES13型小鼠GMCs：上海康朗生物科技有限公司，货号：KL0194。

1.2 药物 木犀草素(Luteolin)：山东临沂艾泽拉斯生物科技有限公司，规格：20 mg；罗格列酮钠片：太极集团重庆涪陵制药厂有限公司，规格: 4mg/片，批号: 15090049。Luteolin及罗格列酮以生理盐水配置为5.00、10.00、20.00 g/L及0.036 g/L的混悬液，

1.3 主要试剂及仪器 四甲基偶氮唑蓝(MTT)：购自美国Sigma(货号：M2128)；……