孙 妍，王 静，侯 喆，武天元，王伟明

(1黑龙江省中医药科学院·黑龙江 哈尔滨 150036;2黑龙江中医药大学·黑龙江 哈尔滨 150040)

1 材料

1.1 实验动物 100只BALB/c小鼠，SPF级，体质量18～22 g，雌雄各半，北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证号SCXK(京)2012-0001。

1.2 菌株 肺炎支原体国际标准株(ATCCFH15531)：美国菌株保藏中心。

1.3 药物及试剂 麦冬饮片：河北安国振宇药业有限公司，批号：130109，经鉴定麦冬为四川麦冬Radix Ophiopogonis(Thunb.)Ker-Gawl.的干燥块根；阿奇霉素分散片(哈药集团制药六厂，批号：30130502)；养阴清肺糖浆：北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂，批号：3150021。TRIzol试剂：美国Invitrogen；One Step SYBR PrimeScript RT-PCR Kit：TaKaRa 公司；MUC5ac引物、β-actin引物：哈尔滨博仕生物技术有限公司；小鼠黏蛋白5ac(MUC5ac)检测试剂盒：USCN Life Science Inc.；PPLO培养基：Becton，Dickinson and Company，USA。试药均在给药前研磨成粉，溶解，涡旋混匀。

1.4 主要仪器 DL-CJ-1W生物净化工作台：北京东连哈尔仪器制造有限公司；MDF-382E-80 ℃低温冰箱：日本三洋公司；Milli-Q Reference system自动双重纯水蒸馏器：MILLI-Q公司；SorvaⅡ ST16低温离心机：Thermo公司；2、20、200μL微量加样器：Eppendoff公司；9600荧光定量PCR仪：杭州博日有限公司；Infinite M200 Pro酶标仪：Tecan公司。

2 方法

2.1 肺炎支原体培养 将MP菌株按1∶9加入到PPLO完全培养基中，置37 ℃生化培养箱进行培养，每天观察颜色变化，培养液由红色变为黄色并澄清透明时即为支原体生长。将处于对数生长期的MP进行CCU定量，常规冻存备用。

2.2 动物分组 100只BALB/c小鼠，随机分为10组，每组10只。分别为正常对照组，模型对照组，阿奇霉素组，养阴清肺组，麦冬多糖高剂量组、中剂量组、低剂量组和麦冬皂苷高剂量组、中剂量组、低剂量组。

2.3 造模、给药及标本采集 除正常对照组外，其余各组用乙醚麻醉，然后用无菌注射器吸取106CCU/mLMP，滴鼻复制MP感染模型，20μL，连续感染3 d；……