黄连对高脂饮食诱导肥胖小鼠胰岛保护作用的实验研究
2021-04-28张力文钟霄毓孙银强
张力文,胡 娜,袁 琳,陆 敏,林 敏,钟霄毓,孙银强,姜 逸,陆 雄
(上海中医药大学科技实验中心·上海 201203)
随着人们饮食结构和生活方式的改变,代谢综合征(metabolic syndrome,MS)发病率近几年显著增长[1],代谢综合征的典型症状如肥胖、高血压、高血脂等已被公认为糖尿病的危险因素, 而血糖的升高与胰岛素抵抗和胰岛分泌功能缺陷相关[2]。黄连属多年生草本植物,黄连的有效成分小檗碱具有提高胰岛素敏感性、降低血糖等作用[3]。本研究旨在探究黄连对高脂饮食喂养的肥胖小鼠胰岛的保护作用,分析其对胰腺组织insulin蛋白表达的影响。
1 实验材料
1.1 动物 C57BL/6小鼠,6周龄,雄性,体质量(18±2)g,购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司,动物许可证号:SCXK(沪)2013-0016,饲养于上海中医药大学动物实验中心SPF实验室。
1.2 药品与试剂 黄连(产地四川,代码90010201,批号:170531):购自上海市浦东新区养和堂,取黄连15 g黄连水煎浓缩至0.76 g/mL。Anti-INS Antibody(1:50):BOSTER,BM0080;DAB显色试剂盒:上海威奥生物科技;葡萄糖注射液:国药集团;Mouse Insulin ELISA试剂盒:ALPCO,REF:80-INS MSEO1,lot:06956。高脂饲料(D12492)(20%蛋白质,20%碳水化合物,60%脂肪):购自Research Diets 公司。
1.3 仪器 YZB/GER314-40罗康全活力型血糖检测仪:德国罗氏诊断公司;血糖试纸:罗氏,批号:D1682;光学显微镜:Leica;超波切片机:Leica;全自动免疫组化仪:Leica;EG1150H自动包埋仪:Leica;ASP200S全自动脱水机:Leica;Autotainer XL自动染色机:Leica;RM2235切片机:Leica;HI1210烘片机:Leica;AI显微图像分析仪:ZEISS。
2 实验方法
2.1 小鼠肥胖模型建立及分组处理 C57BL/6小鼠21只,适应性喂养2 周后,随机分为正常组7只与高脂组(HF)14只。正常组饲以常规鼠饲料;高脂组则饲以高脂组饲料,喂养8周,检测体质量以及空腹血糖(FBG)值。根据体质量、血糖值,将高脂组随机分成模型组、黄连组,每组各7只。……
