杨超君，王跃武，周开珩

川陈皮素防治肝缺血再灌注损伤的作用机制研究

杨超君，王跃武，周开珩

宁波市医疗中心李惠利医院 药剂科，浙江 宁波 315000

探究川陈皮素防治肝缺血再灌注损伤（hepatic ischemia reperfusion injury，HIRI）的作用及机制。SD大鼠随机分为对照组、模型组和川陈皮素（10 mg/kg）组，采用ELISA法检测各组大鼠血清中丙氨酸转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）和天冬氨酸转氨酶（aspartate aminotransferase，AST）活性；采用苏木素-伊红（HE）染色法考察各组大鼠肝组织病理变化；采用透射电子显微镜（TEM）观察各组大鼠肝细胞线粒体结构；采用Western blotting和qRT-PCR考察各组大鼠肝组织自噬相关蛋白Beclin1、微管相关蛋白1轻链3-II（microtubule associated protein 1 light chain 3-II，LC3-II）、自噬相关基因-7（autophagy-related gene-7，ATG-7）、p62蛋白和mRNA表达情况。采用H2O2诱导大鼠肝细胞BRL建立氧化损伤细胞模型，设置对照组、模型组和川陈皮素（10 μmol/L）组，采用Western blotting和qRT-PCR考察各组细胞Beclin1、LC3-II、ATG-7、p62蛋白和mRNA表达情况；采用MitoTracker染色和免疫荧光法考察各组细胞自噬蛋白与线粒体的共定位情况；考察自噬抑制剂和诱导剂对川陈皮素细胞保护作用的影响。与对照组比较，模型组大鼠血清ALT和AST活性均显著升高（＜0.05），肝组织病变，肝细胞线粒体数目增加，结构错乱，受损的线粒体被吞噬，肝组织中LC3-II、Beclin1、ATG-7蛋白和mRNA表达水平显著升高（＜0.05），p62蛋白和mRNA表达水平显著降低（＜0.05）；与模型组比较，川陈皮素组大鼠血清ALT和AST活性明显降低（＜0.05），肝组织病变程度减轻，线粒体形态变化得到明显改善，肝组织中LC3-II、Beclin1、ATG-7蛋白和mRNA表达水平显著降低（＜0.05），p62蛋白和mRNA表达水平显著升高（＜0.05）。氧化损伤细胞模型中BRL细胞LC3-II、Beclin1、ATG-7蛋白和mRNA表达水平显著升高（＜0.05），p62蛋白和mRNA表达水平显著降低（＜0.05），Beclin1和MitoTracker的共定位数目增加；……