葛婉宁 钟敏 张柳笛

0 引言

近年来，除心脏移植之外，心室辅助装置(ventricular assist device，VAD)成为临床上治疗心力衰竭的重要手段[1]。但是在VAD使用过程中，由于非生理性剪切应力(non-physiological shear stress，NPSS)造成血液机械损伤，引起一系列临床并发症，主要包括创伤性溶血和血栓的形成[2-4]。经过近几十年对VAD的研发与改进，溶血和血栓问题已经得到重大改善。然而，近年来，VAD在临床使用上的消化道出血问题开始引起越来越多的关注[5]，VAD植入1年后的出血发生率可高达65%。一些研究发现，VAD中NPSS对血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)的机械损伤是引发临床上出血症状的主要因素[6-9]。然而由于血液成分vWF的机械损伤现象发现和研究较晚，至今仍然定义模糊且缺乏相关的评价标准,非常不利于VAD的创新设计与发展。

vWF是一种在正常凝血过程中发挥重要作用的血浆糖蛋白，分子量较大，最小单体片段为500 kDa，高分子量部分可以超过10 000 kDa[10-12]。与vWF相关的评价参数主要包括高分子量血管性血友病因子(high molecular weight von Willebrand factor,HMW-vWF)的减少量、vWF抗原总含量、以及表征vWF抗原活性的vWF瑞斯托霉素辅因子活性和 vWF胶原结合活性[13]。其中HMW-vWF的损伤测试(vWF多聚体分析实验)可以最直观地反映vWF多聚体分子量分布状况，是评价VAD对vWF损伤的首选测试方法。HMW-vWF多聚体是决定vWF功能的重要部分，当血管破裂时，大量血小板会以HMW-vWF为中介，粘附在胶原纤维上形成血栓得以止血。NPSS对于HMW-vWF多聚体的降解，会直接破坏凝血机制，引发凝血功能异常并导致不同程度的出血事件[14-17]。然而，由于vWF分子量较大，没有合适的内参蛋白作为实验参照，也没有相应分子量的蛋白质分子量标准品来对应实验结果。……