王志坚，王晓敏

(嘉兴学院医学院解剖教研室，浙江 嘉兴 314001)

脑缺血再灌注损伤是一种临床常见疾病，患者缺血再灌注后常常会导致残疾甚至是死亡[1]，对患者和社会构成了极大的负担。再灌注时脑中神经元常常出现DNA的破坏，同时DNA的修复能力也降低，进一步导致受损神经元死亡[2]。以往研究表明，氟西汀对抑郁症患者认知，神经功能的改善有作用[3]，在脑缺血再灌注损伤中的作用尚未十分明确。本文主要探究氟西汀预处理对脑缺血再灌注(I/R)小鼠DNA损伤及修复蛋白Ku80和XRCC1的影响。

1 材料与方法

1.1动物和分组：C57成年健康小鼠120只，从浙江大学动物中心购买。适应性饲养1周后，随机编号，分成3组：假手术组(Sham)、缺血再灌注组(I/R)和氟西汀组(Fluo)，每组各40只，本次研究经过本院医学伦理委员会同意。

1.2方法

1.2.1主要试剂：氟西汀(苏州礼来公司)，Western blot试剂(碧云天)，K80和XRCC1抗体。

1.2.2建立I/R模型及给药：根据改良Longa.Zea氏法制作I/R模型[4]。小鼠麻醉后，固定消毒剃毛，颈正中线处切口，分离各层组织，暴露右侧颈部动脉。分别找出颈内动脉(ICA)、颈外动脉(ECA)和颈总动脉(CCA)，结扎CCA和ECA，ICA靠CCA处打一个活结，然后上端用小动脉夹夹住，CCA上开一个小口，插入线栓，线栓经过ICA慢慢到大脑中动脉，阻断大脑供血。缺血2 h后立刻取出鱼线，结扎缝合，并进行消毒处理。将小鼠放置于温暖的环境。假手术组只暴露动脉血管，并不结扎血管，不插入鱼线阻断供血，其他步骤相同。

1.2.3TTC染色：取各组小鼠新鲜大脑，置于-30℃冰箱速冻10 min，取出后冠状切，厚度约2 mm,1%TCC染色浸泡，置于37℃水浴30 min后取出拍照。……