林毅，王振飞，肖静

福建中医药大学附属人民医院肛肠三科，福建福州350004

进行性骨骼肌流失与消耗是癌性恶病质(cancer cachexia，CC)最典型、最复杂的特征[1]。它常常导致患者的体重下降、活动能力减退等，最终导致免疫功能低下，治疗耐受力下降，缩短了总生存时间[2]。研究表明，肿瘤诱导的肌蛋白降解密切相关的是泛素蛋白连接酶E3，而其中最重要的标记物是肌萎缩F-box蛋白(muscle atrophy F-box，MAFbx)和肌肉环指蛋白-1(muscle ring finger 1，MuRF-1)[3]。该实验建立CT26结肠腺癌诱导的恶病质小鼠模型，在华蟾素片干预与否下，检测和对比净体质量、心肌、腓肠肌和附睾脂肪的质量、腓肠肌组织中MAFbx、MuRF-1 mRNA的表达[4]，来探讨华蟾素片对恶性肿瘤恶病质引起的骨骼肌萎缩的治疗价值，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物与模型建立

清洁级雄性健康小鼠24只，6～8周龄，体重18～22 g。小鼠CT26腺癌细胞经培养媒介（10%小牛血清、1%青霉素、100μg/mL链霉素组成）培养，每3～4天传代1次，3代后收集，经磷酸盐缓冲液冲洗（PBS），制成含肿瘤细胞的混悬液。将5×106(0.2 mL PBS)个细胞接种于16只小鼠前腋窝皮下。

1.2 药物、试剂与仪器

华蟾素片（国药准字Z34020272）。MAFbx(AB3353，1 mg/mL)，MuRf-1(RS1328R，1 mg/mL)；Trizol试剂盒(LGTZ001）。RT-PCR试剂盒(No.121256)。仪器：2720 PCR扩增仪；蛋白电泳仪，DYCZ-26B。

1.3 动物模型建立、分组与给药

24只小鼠按照随机数字表法分为3组：正常组（NN）、单纯恶病质组（CC）、实验组（EG），每组8只。待动物模型建立成功后，实验组予以药物干预：华蟾素片3 g/L溶于生理盐水中，每只实验组小鼠灌喂量为0.1 mL/g，正常组及单纯恶病质组灌喂等量生理盐水，2次/d，连续灌喂14 d。

1.4 观察指标

观察小鼠进入恶病质状态的表征，实验前后记录每只小鼠的净体质量（总体质量减去肿瘤质量），检测实验后每只小鼠心脏、腓肠肌、附睾脂肪的质量。……