Ag(Ⅲ)-鲁米诺流动注射化学发光法用于茶饮料抗氧化活性的评价
2021-04-15王静雨张敏昕张春发张津津
马 天 ,王静雨 ,张敏昕 ,张春发 ,张津津 ,马 莉,2*
(1.河北医科大学 公共卫生学院,石家庄 050017;2.河北省环境与人群健康重点实验室,石家庄 050017)
我国是产茶和饮茶大国,由茶叶开发出的茶饮料是重要的畅销饮料之一。茶多酚是茶叶中多酚类物质的总称,是茶叶中具有保健功能的主要成分,包括儿茶素类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类化合物等。没食子酸(GA,CAS 号:149-91-7)及7种儿茶素化合物[(-)-儿茶素(C,CAS 号:154-23-4)、(-)-表儿茶素(EC,CAS 号:490-46-0)、(-)-表没食子儿茶素(EGC,CAS 号:970-74-1)、(-)-表儿茶素没食子酸酯(ECG,CAS号:1257-08-5)、(-)-没食子儿茶素(GC,CAS 号:3371-27-5)、(-)-没食子儿茶素没食子酸酯(GCG,CAS 号:4233-96-9)、(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG,CAS号:989-51-5)]占所有茶多酚总量的90%以上;其中,EGCG 约占50%,EGC 占约占20%,ECG 约占15%,EC 约占5%,它们是茶叶中的重要活性物质,清除自由基能力显著,具有优异的抗氧化能力[1-4]。
目前,体外抗氧化活性评价方法很多,主要包括2,2-联苯基-1-苦基肼基(DPPH)自由基清除法[5-8]、邻苯三酚-碳酸盐-鲁米诺化学发光法[9]和鲁米诺-过氧化氢化学发光法[10]等。DPPH 自由基清除法是基于测定褪色程度的变化来评价抗氧化活性的[5]。DPPH 会产生一种氮自由基,其醇溶液呈紫色,在517 nm 处有强吸收,当加入抗氧化剂时,抗氧化物中活性氢解离并与DPPH 自由基结合,DPPH 自由基被清除,且被清除的自由基越多,溶液颜色越浅,溶液的褪色程度与吸光度的变化成正比,可用自由基清除率为50%时对应的抗氧化剂浓度即IC50来准确评价抗氧化剂的抗氧化活性[7],活性物质的IC50越小,则抗氧化剂对DPPH 自由基的清除能力越强,抗氧化能力越强。邻……
