王 迪，姬洪卫，王泽东，李晓慧，张 力，魏 峰，刘 全 (1.吉林农业大学 生命科学学院，吉林 长春 130118；.军事医学研究院 军事兽医研究所，吉林 长春 1301；3.佛山科学技术学院 生命工程与科学学院，广东 佛山 58000)

蜱传脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus，TBEV)是一种临床上以突发高热、脑膜刺激症、头痛呕吐、感觉过敏、意识障碍及颈和肢体瘫痪为特征的嗜神经病毒[1]。该病毒分布广泛，主要流行于欧洲和亚洲地区。在我国主要流行于东北、西北和西南等林区。蜱为TBEV的主要传播媒介，全沟硬蜱及蓖子硬蜱是TBEV的主要媒介蜱种[2]。

TBEV的基因组为单股正链RNA，含有单一阅读编码框，编码3个结构蛋白(C、PrM、E)和7个非结构蛋白(NS1、NS2A、NS2B、NS3、NS4A、NS4B、NS5)。其中E蛋白为TBEV的重要结构蛋白，该蛋白内单个氨基酸的改变可影响病毒的毒力和血凝活性等[3]。因此，对于TBEV的分子流行病学研究主要集中于E蛋白中。

近年来，随着气候变暖、人类活动范围扩大，我国森林脑炎又称蜱传脑炎(TBE)发病率有明显上升趋势[4]。本研究为了解我国东北地区蜱源TBEV的流行及毒株进化情况，通过RT-PCR方法对蜱携带TBEV的阳性率及毒株序列突变情况进行分析，为我国东北地区森林脑炎的科学防控奠定基础。

1 材料与方法

1.1 蜱样品采集与鉴定2015年4—6月在吉林省吉林市和黑龙江省双鸭山市使用布旗法采集游离成年蜱，按照采集地点和形态学进行分类，平均15只/管。GenBank下载已发表的硬蜱科、革蜱属和血蜱属的16SrRNA序列，利用Vector NTI软件设计蜱种鉴定引物，由吉林库美生物有限公司合成。

1.2 TBEV检测及统计学分析使用TIANamp Virus RNA Kit 试剂盒提取病毒组RNA，TaKaRa PrimeScript RT reagent Kit和gDNA Eraser合成cDNA链。……