崔建涛,侯承尧,党钰茗,徐 通,赵 宇,田润博,陈红英* (.河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 45000；.河南泌阳县农业科学研究所，河南 泌阳 463700)

伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)属于疱疹病毒科，α-疱疹病毒亚科，可以感染各个年龄段猪，引起生长猪呼吸系统疾病、妊娠母猪繁殖障碍、仔猪神经症状并导致高死亡率，特别是15日龄内仔猪，死亡率高达100%[1]。20世纪70年代，我国从匈牙利引入PRV弱毒疫苗Bartha-K61株，该疫苗在1990—2011年间广泛应用，有效控制了猪伪狂犬病在我国的流行。然而，2011年底，我国大部分地区包括接种Bartha-K61疫苗的猪群大规模暴发猪伪狂犬病，给我国养猪业带来了巨大的经济损失[2]。

猪圆环病毒(porcine circovious,PCV)是目前发现的最小的动物病毒，包括PCV1、PCV2和PCV3三种基因型，其中PCV1对猪群没有致病性[3]，断奶后多系统衰竭综合征主要由PCV2引起，同时也会侵害猪的淋巴系统，造成免疫抑制[4]。2016年，美国PALINSKI等[5]和PHAN等[6]几乎同时发现PCV3，PCV3与PCV密切相关，患病仔猪表现多方面功能紊乱，导致母猪死亡和流产。

由于PRV、PCV2和PCV3均可引起母猪繁殖障碍和呼吸系统疾病，临床上很难区分这3种病毒是单一感染还是混合感染，有报道称PRV、PCV2与PCV3同时感染猪群时，临床表现变得复杂且病猪死亡率增加[7-8]。本试验建立能够同时检测PRV、PCV2和PCV3的三重PCR方法，为这3种疾病的防控提供灵敏、特异和准确的诊断方法。

1 材料与方法

1.1 病毒株和临床样品PRV强毒株(PRV HN2012)、PCV2、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)均由郑州市猪重大疫病防控重点实验室保存。……