E种肠道病毒HY12毒株非结构蛋白3C单克隆抗体的制备与鉴定
2021-04-12蔡梦露宋亚伟王玮玉王浴光王新平吉林大学动物医学学院教育部人兽共患病研究重点实验室吉林长春130062
蔡梦露,章 凡,宋亚伟,王玮玉,王浴光,董 坤,王新平 (吉林大学 动物医学学院 教育部人兽共患病研究重点实验室,吉林 长春 130062)
牛肠道病毒感染是由牛肠道病毒(bovine Enterovirus,BEV)引起的一种临床上以消化道和呼吸道症状为主要特征的传染病。牛群感染该病毒后常表现为发热、咳嗽、呼吸困难、腹泻等症状,严重者甚至出现突然死亡[1]。根据病毒最新分类,肠道病毒属分为12个肠道病毒种和3个鼻病毒种,其中,E、F以及G种肠道病毒的感染均能够给畜牧业的发展造成严重危害[2]。1959年,MOLL等[3]首次报道了BEV感染的病例,随后BEV感染在世界许多国家发生和流行[4-5]。本实验室于2012年从吉林省某牛场的病牛体内分离到了国内首株E种肠道病毒,并通过分子生物克隆技术获得其全基因组序列[6]。
肠道病毒是呈二十面体对称且无囊膜包裹的单股、正链RNA病毒,其全基因组长度约为7.5 kb,包含1个大的开放阅读框(ORF),可翻译出1个前体多聚蛋白[7-8]。翻译出的多聚蛋白在蛋白水解酶的裂解作用下,可被水解为前体蛋白P1、P2和P3。前体蛋白P1又可经水解作用加工形成病毒衣壳蛋白VP1、VP2、VP3和VP4,它们负责病毒的进入、包壳以及病毒粒子的组装。前体蛋白P2和P3可水解生成7种非结构蛋白2A、2B、2C、3A、3B、3C和3D,具有参与病毒翻译和复制,促进细胞凋亡等作用[9-12]。其中,非结构蛋白3C约包含184个氨基酸,是肠道病毒中不可缺少的蛋白酶,可裂解前体蛋白P2和P3生成其他非结构蛋白;同时,3C具有RNA结合活性,可抑制宿主体内的Ⅰ型干扰素反应从而干扰宿主的天然免疫,在病毒复制以及诱导宿主细胞凋亡的过程中都扮演着重要的角色[13-14]。……
