马来穿山甲源嗜水气单胞菌亚种的分离鉴定及生物学特性分析
2021-04-07杜雪晴古河祥萨家祺吴亚江侯方晖肖嘉杰翟俊琼邹洁建
杜雪晴,古河祥,萨家祺,吴亚江,侯方晖,肖嘉杰,翟俊琼,陈 武,邹洁建
(1.广州动物园,广州市野生动物研究中心,广东广州 510070;2.广东省野生动物救护中心,广东广州 510520)
嗜水气单胞菌属于弧菌科气单胞菌属,可从自然水体、土壤中被分离检测到,是目前普遍存在的一种人、畜、水生动物共患病原菌[1]。在一定条件下,该菌还能感染鱼类、鸟类、爬行类和两栖类动物,致使感染动物出现不同程度的腹泻、败血症、肝脏大、皮肤溃烂等症状[2-4],因此做好该病的诊断,了解感染菌株的致病性及耐药情况并及时治疗,是防治的重要途径。
2019 年3 月,救护转移至广东省野生动物救护中心的1 只马来穿山甲腿部肌肉出现感染溃烂,通过无菌操作取腿部溃烂组织进行细菌分离培养,得到1 株优势菌。经形态特性、革兰氏染色及16S rRNA 和gyrB基因序列进化树分析鉴定,证实其为嗜水气单胞菌亚种Aeromonas hydrophilasubsp.Dhakensis(缩写Aeromonas dhakensis)。本研究对该病原菌的生物学特性、遗传进化特征、毒力因子及耐药情况进行研究,以期为嗜水气单胞菌的流行病学调查及其感染的防治提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
血琼脂培养基、MH 培养基、LB 液体培养基、PCA 平板技术琼脂、革兰氏染色试剂盒、细菌基因组DNA 提取试剂盒、2×TaqPCR Master Mix,均购自广州维宁生物科技有限公司;18 种标准药敏纸片,由温州市康泰生物科技有限公司生产;细菌16S rRNA、gyrB基因、耐药基因、毒力基因的引物合成和测序,均由广州睿博兴科生物技术公司完成;42 只SPF 昆明小鼠(6 周龄),购自广东省医学实验动物中心,体质量(30±5)g。……
