项锦敏，赵琼瑜，远 航，彭振辉，宋 伟

浙江万里学院生物与环境学院，宁波 315100

黑色素是目前所知唯一能保护生物体免受辐射伤害的天然内源性生物聚合体，具有很强的生理活性，能够有效的消除自由基[1]，对人体具有提高机体免疫力[2]、防止衰老[3,4]、抑制病毒[5]等功能。因此，黑色素被广泛应用于医药、食品和保健品等领域。目前，天然黑色素的开发研究主要集中在植物、真菌类材料。动物中黑色素与蛋白质、脂肪等紧密相连、不易分离。因此，动物来源的黑色素研究局限在乌骨鸡[6]、泥鳅[7]、大鲵[8]、海参[9]等少数乌质性状动物材料中。

“清溪乌鳖”(Pelodiscussinensis，以下简称“乌鳖”)是从中华鳖的体色变异个体经过扩繁得到的新品种[10]，是浙江省特有地方品种，其典型形态特征是全身体色乌黑，富含黑色素，具有很高的食药用价值[11]。近年来，国内外学者主要从形态特征[10]、养殖性能[12]、营养成分[13]、同工酶[14]、细胞水平和DNA分子水平[15]等方面对乌鳖种质资源进行研究。有关乌鳖中黑色素的研究却鲜见报道。本文以乌鳖肌肉为原材料采用“脱脂-酶解-酸解”三步法制备乌鳖黑色素，探讨其结构、理化性质以及抗氧化活性，以期为乌鳖综合利用以及高值化产品的开发提供一定的理论基础。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

材料：乌鳖，体重约为500 g，购于浙江清溪鳖业有限公司。

试剂：黑色素标准品(美国Sigma公司)；木瓜蛋白酶，酶活力≥2 000 U/mg(生工生物工程(上海)股份有限公司)；甲醇、无水乙醚、无水乙醇、乙酸乙酯、氯仿、石油醚、丙酮、二甲基亚砜、盐酸、氢氧化钠、乙酸、氢氧化钠、溴化钾、浓硫酸、磷酸钠、钼酸铵、甲硫氨酸、氮蓝四唑、乙二胺四乙酸二钠、核黄素，AR(国药集团化学试剂有限公司)；……