李 昶，刘莎莎

(湖南娄底职业技术学院，湖南娄底 417000)

兔的腹泻病是临床中常见疾病之一，引起兔腹泻的因素很多，病原性因素主要有病毒、细菌、寄生虫、附红细胞体等多种病原，还有饲养管理不当、卫生条件差、饲料突变等非病原性因素。相关研究表明病原性因素引起的腹泻发病率和死亡率均较高，其病死亡率高达70%以上，成为危害兔养殖业主要疾病之一[1-3]。引起幼兔腹泻的病原菌主要有大肠埃希氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌、铜绿假单胞菌、产气荚膜梭菌、金黄色葡萄球菌等，这些病原菌一旦引起发病，可以波及全群[4]。因此，在家兔养殖中应该重视腹泻性疾病的防控，同时还要注意环境卫生与定期消毒，减少该病的发生与流行。本研究采集发生腹泻的家兔肛拭子、粪便120份病料进行病原菌分离鉴定，并对病原菌致病性和耐药性进行检测。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病料来源 2018年-2019年，采集娄底地区发生腹泻的家兔肛拭子、粪便203份。

1.1.2 主要试剂 琼脂糖胶回收试剂盒、2×TaqMarker Mix，北京天根生化科技有限公司产品；DNA Marker DL 2 000，北京中科瑞泰生物公司产品；含卡那霉素、卵黄的CW琼脂培养基、甘露醇氯化钠琼脂培养基、大肠埃希氏菌显色鉴别培养基、SS培养基、XLD培养基、70 mL/L绵羊血培养基、MH培养基、厌气肉肝汤培养基、普通营养肉汤，青岛海博生物有限责任公司产品；肠科杆菌生化鉴定试条、药敏纸片，杭州微生物试剂公司产品。

1.1.3 仪器设备 恒温培养箱(DHP-9082),上海鳌珍仪器制造有限公司产品；PCR仪(G5100-6400),美国Agilent Technologie公司产品；……